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2951
β-Catenin Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

β-Catenin Antibody Sampler Kit #2951

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β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 1

使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对 HCT116 细胞中提取的交联染色质,在加入 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 或 Non-phospho (Active) β-Catenin (Ser33/37/Thr41) (D13A1) Rabbit mAb #8814 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。本图显示整个 AXIN2(β-Catenin的一个已知靶基因)范围内的结合作用(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他图)。如需了解其他 ChIP-seq 情况,请下载产品说明书。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 2

使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb(绿色)对 HeLa(左图)和 NCI-H28(右图)细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 3

使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb #8480(上图)或 β-actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对对照 HeLa 细胞(泳道 1)或 β-Catenin编码基因出现明显框内截短突变的 HeLa 细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白印迹分析。突变 HeLa 细胞中 β-Catenin分子量的变化与框内缺失一致。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 4

使用 Phospho-β-Catenin (Ser33/37/Thr41) Antibody(上)或 β-Catenin Antibody #9562(下),对经 20 mM LiCl 预处理 30 分钟后用 50 nM calyculin A 处理的 293 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 5

使用 Phospho-β-Catenin (Thr41/Ser45) Antibody(上)或 β-Catenin Antibody #9562(下),对经 20 mM LiCl 预处理 30 分钟后用 50 nM calyculin A 处理的 293 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 6

使用 Phospho-β-Catenin (Ser552) (D8E11) Rabbit mAb(上)或 β-Catenin (6B3) Rabbit mAb

#9582(下),对未经处理或经 λ 磷酸酶处理的 SK-N-MC 和 NTERA-2 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 7

使用 Phospho-β-Catenin (Ser675) (D2F1) XP® Rabbit mAb(上图)或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对对照 HeLa 细胞(泳道 1)或 β-连环蛋白编码基因出现靶突变的 HeLa 细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白印迹分析。突变 HeLa 细胞中 β-Catenin分子量的变化证实了抗体对 β-Catenin的特异性。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 8

使用 Phospho-β-Catenin (Ser675) (D2F1) XP® Rabbit mAb(绿色),对大鼠结肠进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 9

一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 10

使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 HCT 116 细胞的交联染色质,在加入 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后进行染色质免疫沉淀法分析。使用 SimpleChIP®Human Axin2 Intron 1 Primers #8973、SimpleChIP®Human CaMK2D Intron 3 Primers #5111、human c-Myc promoter primers 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 并通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 11

使用 Phospho-β-Catenin (Ser33/37/Thr41) Antibody 对 SW480 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 12

使用 Phospho-β-Catenin (Thr41/Ser45) Antibody 对 SW480 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 13

使用 Phospho-β-Catenin (Ser675) (D2F1) XP® Rabbit mAb(上)或 β-Catenin (6B3) Rabbit mAb #9582(下),对未经处理或经 λ 磷酸酶处理 1 小时,或经 Forskolin (FSK) 处理 30 分钟的 MKN-45 和 SK-N-MC 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 14

使用 Phospho-β-Catenin (Ser675) (D2F1) XP® Rabbit mAb(绿色),对未经处理(左)、经 λ 磷酸酶处理(中)的 Hela 细胞或未经处理的 NCI-H28 细胞(β 连环蛋白缺失;右)进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 15

使用 β-Catenin (D10A8) XP® 兔单克隆抗体(实线)或浓度匹配的 Rabbit Isotype Control #3900(虚线)对 NCI-H28(蓝色)和 HeLa 细胞(绿色)进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 16

使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb(绿色)对小鼠结肠进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 17

使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 对冷冻的小鼠结肠细胞进行免疫组织化学分析。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 18

使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 19

使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 20

使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 HeLa(左图)或 NCI-H28(右图)细胞团进行免疫组织化学分析。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 21

在对照肽(左图)或抗原特异性肽(右图)存在的情况下,使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠结肠细胞进行免疫组织化学分析。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 22

使用 ß-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb对石蜡包埋的人结肠腺癌进行免疫组织化学分析。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 23

使用 ß-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb对石蜡包埋的人结肠腺癌进行免疫组织化学分析。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 24

使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析。

β-Catenin Antibody Sampler Kit: 图像 25

使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

购买 # 2951T
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1 个试剂盒(5 x 20 µl)

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产品说明

β-Catenin Antibody Sampler Kit 提供一种经济的方法,检测总 β-连环蛋白和在不同残基上磷酸化的 β-连环蛋白。试剂盒包含足够的一抗和二抗,每种抗体可进行 2 次蛋白质印迹实验。

特异性/敏感性

试剂盒中的每种抗体仅可识别其特定靶标,不与其他家族成员发生交叉反应。

来源/纯化

使用与人 β 连环蛋白 Ser33、Ser37 和 Thr41 周围残基或人 β 连环蛋白 Thr41 和 Ser45 周围残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。使用与人 β 连环蛋白 Pro714 周围残基相对应的合成肽、与人 β 连环蛋白 Ser552 周围残基相对应的合成磷酸肽或与人 β 连环蛋白 Ser675 周围残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

β-Catenin是 Wnt 信号转导通路中的一个关键下游效应分子 (1)。它与脊椎动物的两个重要生物过程有关:早期胚胎发育 (2) 和肿瘤形成 (3)。CK1 可以在 Ser45 位点使 β-Catenin 磷酸化。该磷酸化会导致 β-Catenin 随后能被 GSK-3β 磷酸化 (4-6)。GSK-3β 通过在 Ser33、Ser37 和 Thr41 位点磷酸化 β-Catenin以将其降解 (7)。这些位点发生突变会提高 β-Catenin 的稳定性,并且已在多种肿瘤细胞系中发现了这些突变 (8)。

经证实 Akt 和 PKA 均可在 Ser552 和 Ser675 位点磷酸化 β 连环蛋白。在 Ser552 和 Ser675 位点的磷酸化,会诱导 β 连环蛋白在胞核累积,增强转录活性 (9-12)。

  1. Cadigan, K.M. and Nusse, R. (1997) Genes Dev 11, 3286-3305.
  2. Wodarz, A. and Nusse, R. (1998) Annu Rev Cell Dev Biol 14, 59-88.
  3. Polakis, P. (1999) Curr Opin Genet Dev 9, 15-21.
  4. Amit, S. et al. (2002) Genes Dev 16, 1066-76.
  5. Liu, C. et al. (2002) Cell 108, 837-47.
  6. Yanagawa, S. et al. (2002) EMBO J 21, 1733-42.
  7. Yost, C. et al. (1996) Genes Dev 10, 1443-54.
  8. Morin, P.J. et al. (1997) Science 275, 1787-90.
  9. Taurin, S. et al. (2006) J. Biol. Chem. 281, 9971-9976.
  10. Fang D et al. (2007) J Biol Chem 282, 11221–9
  11. He, X.C. et al. (2007) Nat. Genet. 39, 189-198.
  12. Hino S et al. (2005) Mol Cell Biol 25, 9063–72

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

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