反应性 | H Mk |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 48 |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
免疫荧光法(免疫细胞化学) | 1:100 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
若想获得高质量的免疫荧光图片,请使用我们 #12727 Immunofluorescence Application Solutions Kit 中高效且划算的预制试剂。
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
建议使用偶联荧光素的抗兔二抗:
注意:细胞应当在多孔板、腔室玻片或盖玻片上直接培养、处理、固定和染色。
吸干液体,随后在细胞上覆盖一层 2–3 mm 用 1X PBS 稀释的 4% 甲醛。
注意:甲醛有毒性,需在通风橱中使用。
注意:所有随后的孵育都应当在室温下完成,除非另有注明需要在避光湿盒或带盖的培养皿/板中孵育,以防止干燥和荧光物质淬灭。
发布时间 2006 年 11 月
修订时间 2013 年 11 月
实验步骤编号:24
人, 猴
使用与人类 Aurora A/AIK 蛋白氨基末端相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
Aurora A (AIK) 是一个细胞周期调控丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在多种癌细胞系中过表达 (1-3)。Aurora A 在激酶激活环内的 Thr288 磷酸化后,导致蛋白活性大幅增加,并可能将蛋白在有丝分裂时靶标蛋白酶体降解 (4)。已发现密切相关激酶 Aurora B (AIM1) 在多个有丝分裂事件中发挥作用 (5),用 siRNA 使得 Aurora B 静默表达可导致组蛋白 H3 磷酸化、染色体对齐/隔离异常、生存素定位改变 (6)。
探索与本品相关的通路。
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