反应性 | H M R Mk |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 55 |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
蛋白质印迹法就是将膜与 5% w/v 脱脂奶粉、1X TBS 以及 0.1% Tween® 20 中的稀释的一抗在 4°C 下进行夜间孵育,同时轻轻晃动。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:263
人, 小鼠, 大鼠, 猴
使用与人 ATP6V1B2 蛋白羧基末端附近残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
真核细胞含有称作液泡 H+-ATP 酶(V-ATP 酶)的 ATP 驱动型质子泵,这种质子泵使胞内区室酸化并且跨质膜转移质子 (1,2)。胞内 v-ATP 酶在内吞和胞内膜转运中发挥重要作用,而质膜 v-ATP 酶在尿酸化和骨吸收等多个过程发挥重要作用 (1,2)。液泡 ATP 酶是较大的异源多聚体蛋白复合体,在 V1 周围结构域或 V0 整合结构域存在组分蛋白 (2)。胞质 V1 结构域含有 A 和 B 催化性亚基的六聚物,以及 ATP 酶装配和 ATP 水解所需的多种其他蛋白质亚基。V0 v-ATP 酶整合结构域显示蛋白质转移酶活性,并且负责跨膜转运质子 (2)。研究显示,v-ATP 酶 ATP6V0c、ATP6V0d1、ATP6V1A、ATP6V1B2 和 ATP6V1D 与调节分子蛋白复合体相互作用,并且为溶酶体表面上氨基酸诱导的 mTORC1 激活所必需 (3)。
人类中找到 B 亚基的两个同工型:ATP6V1B1 和 ATP6V1B2。ATP6V1B1 蛋白主要在肾中表达,相应基因中的突变会引起与进展性耳聋相关的某种形式的肾小管性酸中毒(4,5)。ATP6V1B2 蛋白显示更宽的表达范围,并定位于肾、脑、胰和其他组织 (4)。
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