反应性 | H |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 14 |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人
使用对人血管生成素蛋白具有特异性的重组蛋白对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
血管生成素 (ANG, RNase 5) 是核糖核酸酶 A 超家族 的成员 (1,2) 。它在细胞和组织功能中发挥多种不同的作用,包括血管生成、先天免疫功能、信号转导和细胞应激反应。已证明血管生成素促进肿瘤形成,但也与防范神经退行性疾病有关 (3-6)。血管生成素可以分泌入血浆中,但也存在于各种组织和细胞类型中。它是一种高度多效的蛋白质,通过许多不同的机制发挥作用。在细胞外基质中,血管生成素促进肌动蛋白聚合,并与纤溶酶原激活系统的成员相互作用以刺激纤溶酶生成并促进细胞迁移 (7,8)。在细胞表面,血管生成素与受体如神经丛蛋白 B2 和 EGFR 结合,激活促进细胞增殖和存活的信号转导通路(例如 ERK 和 Akt) (9,10)。血管生成素也通过受体介导的内吞作用进入细胞; 它可能在生长条件下积聚在核仁中,或在应激条件下积聚在细胞浆中。在核仁内部,已证明血管生成素表观遗传地激活 rDNA 的启动子区域,从而刺激 rRNA 转录。在细胞应激条件下,据报道血管生成素转位至细胞浆,并在反密码子环中切割 tRNA 以产生 tiRNA 片段。这些应激诱导的 tiRNA 片段启动了保护宿主细胞免于凋亡的细胞应激反应 (11)。
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