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25015
PhosphoPlus® Androgen Receptor (Ser258) Antibody Duet
一抗
抗体对

PhosphoPlus® Androgen Receptor (Ser258) Antibody Duet #25015

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PhosphoPlus® Androgen Receptor (Ser258) Antibody Duet: Image 1
使用 Phospho-Androgen Receptor (Ser258) (E4L1I) Rabbit mAb(上图)或 Androgen Receptor (D6F11) XP®5 Rabbit mAb #3(下图),对 LNCaP 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析,这些细胞已在无酚红培养基和活性炭剥离的 % FBS 中培育 5153 天,然后未经处理(-)、经二氢睾酮 (DHT)处理(+)或经 DHT 处理并且随后用 λ 磷酸酶和牛小肠磷酸酶 (CIP)(+)处理 。
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PhosphoPlus® Androgen Receptor (Ser258) Antibody Duet: Image 2
使用 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb(上)和 β-Actin Antibody #4967(下)对 LNCaP (AR+)、MCF7 (AR+)、PC-3 (AR-) 和 DU 145 (AR-) 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
PhosphoPlus® Androgen Receptor (Ser258) Antibody Duet: Image 3
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,对在无酚红色培养基和 5% 活性炭炭剥离的 FBS 生长 3 天后再用双氢睾酮(DHT,10 nM)处理 4 小时的 LNCaP 细胞和 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示了雄激素受体的已知靶基因 KLK2 内的结合(参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图)。
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PhosphoPlus® Androgen Receptor (Ser258) Antibody Duet: Image 4
对来自 LNCaP 细胞提取物的磷酸-雄激素受体 (Ser258) 蛋白进行免疫沉淀分析。将细胞在无酚红培养基和活性炭剥离的 5% FBS 中生长 3 天,然后用二氢睾酮(DHT)处理(5 nM,6 小时)。泳道 1 为 10% 输入,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 Phospho-Androgen Receptor (Ser258) (E4L1I) Rabbit mAb。使用 Phospho-Androgen Receptor (Ser258) (E4L1I) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
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PhosphoPlus® Androgen Receptor (Ser258) Antibody Duet: Image 5
使用 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 LNCaP(AR+,左)和 DU145(AR-,右)进行免疫组织化学分析。
PhosphoPlus® Androgen Receptor (Ser258) Antibody Duet: Image 6
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,对在无酚红色培养基和 5% 活性炭炭剥离的 FBS 生长 3 天后再用双氢睾酮(DHT,10 nM)处理 4 小时的 LNCaP 细胞和 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示了染色体 19(上图)内的结合,包括雄激素受体的已知靶基因 KLK2(下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
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PhosphoPlus® Androgen Receptor (Ser258) Antibody Duet: Image 7
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,用来自 LNCaP 细胞的交联染色质进行染色质免疫沉淀分析,这些细胞已在无酚红培养基和活性炭剥离的 5% FBS 中培养 3天,然后用双氢睾酮(DHT)(5 nM, 6 小时)及 Phospho-Androgen Receptor (Ser258) (E4L1I) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729​ 处理。使用 SimpleChIP® Human KLK3 Promoter Primers #32784 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
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PhosphoPlus® Androgen Receptor (Ser258) Antibody Duet: Image 8
使用 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人前列腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
PhosphoPlus® Androgen Receptor (Ser258) Antibody Duet: Image 9
使用 CUT&RUN Assay Kit #66362,对在无酚红色培养基和 5% 活性炭炭剥离的 FBS 生长 3 天后再用双氢睾酮(DHT,10 nM)处理 4 小时的 LNCaP 细胞和 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #86652 进行 CUT&RUN 分析。使用 SimpleChIP® Human KLK2 Intron 1 Primers #62086 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时聚合酶链反应 (PCR) 对富集 DNA 进行量化分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
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PhosphoPlus® Androgen Receptor (Ser258) Antibody Duet: Image 10
使用 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb(绿色),对 LNCaP(阳性,左)和 DU145(阴性,右)细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。
PhosphoPlus® Androgen Receptor (Ser258) Antibody Duet: Image 11
使用 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对 DU-145 细胞(蓝色)和 LNCaP 细胞(绿色)进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
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PhosphoPlus® Androgen Receptor (Ser258) Antibody Duet: Image 12
使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒(磁珠法) #9005 对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 3 天,随后用双氢睾酮 (DHT,10 nM) 处理 4 小时的 LNCaP 细胞的交联染色质与雄激素受体 (D6F11) XP® 兔单克隆抗体进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在雄激素受体的已知靶基因 KLK2 内结合(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。如需了解其他 ChIP-seq 情况,请下载产品说明书。
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PhosphoPlus® Androgen Receptor (Ser258) Antibody Duet: Image 13
使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒(磁珠法) #9005 对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 3 天,随后用双氢睾酮 (DHT,10 nM) 处理 4 小时的 LNCaP 细胞的交联染色质与雄激素受体 (D6F11) XP® 兔单克隆抗体进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示了染色体 19(上图)内的结合,包括雄激素受体的已知靶基因 KLK2(下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
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PhosphoPlus® Androgen Receptor (Ser258) Antibody Duet: Image 14
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对在无酚红培养基和 5% 炭剥离的 FBS 中培养 3天,随后用 双氢睾酮(DHT,10 nM)处理 4 小时的 LNCaP 细胞中提取的交联染色质,在加入 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729​ 后,进行染色质免疫沉淀。使用 using SimpleChIP® Human KLK2 Intron 1 Primers #62086, SimpleChIP® Human KLK3 Promoter Primers #32784 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486, 通过实时 PCR 对富集 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
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To Purchase # 25015S
目录# 规格 价格 库存
25015S
1 个试剂盒

产品包括 数量 反应性 MW (kDa) 同型
Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb 5153 100 µl H 110 兔 IgG
Phospho-Androgen Receptor (Ser258) (E4L1I) Rabbit mAb 16969 100 µl H 110 兔 IgG

产品说明

Cell Signaling Technology (CST) 的 PhosphoPlus® Duets 为评估蛋白激活状态提供了一种方法。每个 Duet 都包含针对靶标的激活状态和总蛋白抗体。根据这些抗体在特定应用中的出色表现,将其从 CST 提供的产品中选择出来。
MW (kDa) 110

背景

雄激素受体 (AR) 是一种属于核受体超家族的锌指转录因子,在结合配体时通过磷酸化和二聚化激活 (1)。这会促进胞核定位,并使 AR 结合雄激素靶标基因中的雄激素反应元件。研究表明,AR 在男性发育的多个阶段以及前列腺癌进展中起到关键作用 (2,3)。
一旦结合配体,则 AR 在许多残基(包括 Ser258)上磷酸化 (4)。
  1. Li, J. and Al-Azzawi, F. (2009) Maturitas 63, 142-8.
  2. Avila, D.M. et al. (2001) J. Steroid. Biochem. Mol. Biol. 76, 135-142.
  3. Montgomery, J.S. et al. (2001) J. Pathol. 195, 138-146.
  4. Gioeli, D. et al. (2002) J Biol Chem 277, 29304-14.

通路与蛋白质

探索与本产品相关的通路 + 蛋白质。

限制使用

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仅供研究使用。不得用于诊断流程。
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PhosphoPlus 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
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