反应性 | H M R |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 10 |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
免疫组织化学(石蜡) | 1:500 - 1:2000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
注意:在制作过程中务必随时保持切片处于湿润状态。
对于柠檬酸盐:将切片浸入 1 X 柠檬酸盐修复液,再放入微波炉中加热直至沸腾;继续保持亚沸腾温度 10 分钟 (95°-98°C)。在实验台上冷却切片 30 分钟。
推荐的 检测试剂 |
SignalStain® Boost IHC Detection Reagent (HRP, Rabbit) #8114 | SignalStain® Boost IHC Detection Reagent (AP, Rabbit) #18653 |
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兼容的 色原 |
SignalStain® DAB Substrate Kit #8059 | SignalStain® Vibrant Red Alkaline Phosphatase Substrate Kit #76713 |
SignalStain® Vivid Purple Peroxidase Substrate Kit #96632 | SignalStain® Ultra Blue Alkaline Phosphatase Substrate Kit #12824 | |
SignalStain® Deep Black Peroxidase Substrate Kit #72986 | ||
SignalStain® Radiant Yellow Peroxidase Substrate Kit #69644 |
注意:使用本实验步骤中未指定的检测试剂可能需要进一步优化一抗,考虑到检测试剂的不同灵敏度。
发布时间 2010 年 2 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:283
人, 小鼠, 大鼠
使用重组人 ACBP/DBI 蛋白对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
酰基辅酶 A 结合蛋白 (ACBP) 与长链酰基辅酶 A 分子结合并调节脂质代谢。该蛋白也称为地西泮结合抑制蛋白 (DBI)并且结合于γ-氨基丁酸 (GABA) A 型受体 (GABAAR) 的苯二氮䓬结合位点,从而调节其活性 (1)。ACBP/DBI 在胶质母细胞瘤中高表达,并通过向线粒体提供长链酰基辅酶 A 分子进行脂肪酸氧化来促进胶质母细胞瘤生长。ACBP/DBI 表达减少导致胶质母细胞瘤增殖更慢 (2,3)。此外,ACBP/DBI 是成年小鼠神经源性生态位中神经祖细胞和干细胞增殖的调节分子 (4,5)。研究表明,ACBP/DBI 通过 GABA 信号转导来调节兴奋性和抑制性神经元的胚胎神经发生 (6)。
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