反应性 | M |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | 235 |
来源 | 兔 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
免疫沉淀 | 1:100 |
保存在 10mM sodium HEPES(pH 为 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA 和 50% 甘油中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。
蛋白质印迹法就是将膜与 5% w/v 脱脂奶粉、1X TBS 以及 0.1% Tween® 20 中的稀释的一抗在 4°C 下进行夜间孵育,同时轻轻晃动。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#13953,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:263
本实验步骤适用于使用 Protein A agarose beads 对天然蛋白进行免疫沉淀,以进行蛋白质免疫印迹或激酶活性分析。
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
10X 细胞裂解缓冲液:(#9803) 要制备 10 ml 的 1X 细胞裂解缓冲液,将 1 ml 细胞裂解缓冲液添加至 9 ml dH2O,并混合。
注意:使用前,请立即添加 1 mM PMSF (#8553)。
继续下述其中一项的具体步骤。
注意:为了最大限度减少变性 IgG 重链产生的遮盖作用 (~50 kDa),我们建议使用 Mouse Anti-Rabbit IgG (Light-Chain Specific) (L57A3) mAb (#3677) 或 Mouse Anti-Rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (#3678)(或 HRP conjugate #5127)。为了最大限度减少变性 IgG 轻链产生的遮盖作用 (~25 kDa),我们建议使用 Mouse Anti-Rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (#3678)(或 HRP conjugate #5127)
发布于 2008 年 12 月
修订于 2018 年 4 月
实验步骤编号:409
ABCA7 抗体 (特定小鼠) 可检测小鼠 ABCA7 总蛋白的内源水平。
小鼠
使用与小鼠 ABCA7 蛋白中 Val2145 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白质 A 和肽亲和色谱对抗体进行纯化。
ATP 结合盒 (ABC) 蛋白是位于细胞膜上的转运蛋白,可以依赖于 APT 的方式在细胞膜上转运底物。ABC 底物会在细胞膜上被活跃转运,包括离子、氨基酸、脂质和类固醇 (1)。ATP 结合盒亚家族 A 成员 7 (ABCA7) 是 ABC 家族的一员,并且可调控中枢神经系统 (CNS) 和外周组织中的磷脂和胆固醇平衡。像绝大多数 ABC 转运蛋白一样,ABCA7 包含两个由六个跨膜螺旋和两个核苷酸结合域构成的跨膜结构域束。ABCA7 及其最相近的同源物 ABCA1 是 ABC 的 12A 类成员,两种蛋白可以一种依赖于载脂蛋白 A (apoA) 的方式转运胆固醇和磷脂 (2,3)。ABCA7 在各种组织中表达,并显示在 CNS 神经元和小胶质细胞中富集 (4)。人基因研究发现了 ABCA7 基因变种,包括与晚发性阿尔茨海默病 (AD) 有关的功能丧失突变 (5)。ABCA7 功能紊乱会加快淀粉样-β (Aβ) 生成和/或改变依赖于小胶质细胞的 Aβ 吞噬,因而会直接导致 AD 发病 (4,6,7)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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