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11972
LC3 Control Cell Extracts
实验对照
细胞提取试剂盒

LC3 Control Cell Extracts #11972

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  1. WB
Western Blotting Image 1: LC3 Control Cell Extracts
使用 LC3B (D11) XP® Rabbit mAb #3868 (上图)、LC3A/B Antibody #4108 (中图) 或 β-Tubulin (9F3) Rabbit mAb #2128 (下图) ,对未经处理 (-) 或经氯喹处理(50 μM, 过夜; +)的 Hela 细胞的 LC3 对照细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

产品使用信息

使用前请先煮沸 3 分钟。每条泳道上样 10 µl 的未经处理或经氯喹处理的 LC3 对照细胞提取物。

保存

保存在SDS上样缓冲液中:含 62.5 mM Tris-HCl (pH 6.8,25°C)、2 % w/v SDS、10 % 甘油、50 mM DTT、0.01% w/v 溴酚蓝或酚红。
保存在 -20ºC 或 -80ºC(长期储存)下。

产品说明

LC3 Control Cell Extracts(未经处理的 HeLa):HeLa 细胞的总细胞提取物用作阴性对照。保存在 SDS 样品缓冲液中。

LC3 Control Cell Extracts (HeLa +Chloroquine):经50 μM Chloroquine 过夜处理的 HeLa 细胞的总细胞提取物用作阳性对照。

该裂解物对用作 LC3A 和 LC3B 蛋白质印迹实验的对照。在这些裂解物中无法检测到 LC3C。

背景

自噬是自噬溶酶体降解大部分细胞浆内容物的一种分解代谢过程 (1,2)。自噬通常在营养不足的情况下被激活,但也与许多生理过程有关,包括发育、分化、神经退行性疾病、感染以及癌症 (3)。自噬标志物轻链 3 (LC3) 最初被识别为微管相关蛋白 1A 和 1B(被称为 MAP1LC3)的亚基 (4),随后发现其与对自噬十分关键的酵母蛋白 Apg8/Aut7/Cvt5 具有相似性 (5)。在自噬期间,有三种人源 LC3 同工型(LC3A、LC3B 和 LC3C)发生翻译后修饰 (6-9)。合成后在 LC3 羧基末端迅速裂解,可产生胞质的 LC3-I 型。在自噬过程中,通过一个涉及 Atg7 和 Atg3 的类泛素体系,LC3-I 被脂质化为 LC3-II,从而将 LC3 与自噬小泡结合 (6-10)。自噬体中 LC3的存在,以及转化成向下迁移的 LC3-II,是自噬发生的标志 (11)。
  1. Reggiori, F. and Klionsky, D.J. (2002) Eukaryot. Cell 1, 11-21.
  2. Codogno, P. and Meijer, A.J. (2005) Cell Death Differ. 12 Suppl 2, 1509-18.
  3. Levine, B. and Yuan, J. (2005) J. Clin. Invest. 115, 2679-88.
  4. Mann, S.S. and Hammarback, J.A. (1994) J. Biol. Chem. 269, 11492-97.
  5. Lang, T. et al. (1998) EMBO J. 17, 3597-607.
  6. Kabeya, Y. et al. (2000) EMBO J. 19, 5720-28.
  7. He, H. et al. (2003) J. Biol. Chem. 278, 29278-87.
  8. Tanida, I. et al. (2004) J. Biol. Chem. 279, 47704-10.
  9. Wu, J. et al. (2006) Biochem. Biophys. Res. Commun. 339, 437-42.
  10. Ichimura, Y. et al. (2000) Nature 408, 488-92.
  11. Kabeya, Y. et al. (2004) J. Cell Sci. 117, 2805-12.

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11972S
100 µl (10 次蛋白印迹实验)

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