HIF-1α/2α Control Cell Extracts #94790

产品使用信息

使用前请先煮沸 3 分钟。每条泳道上样 10 µl 的未经处理或经氯喹处理的 HIF-1α/2α 对照细胞提取物。

保存

保存在SDS上样缓冲液中：含 62.5 mM Tris-HCl (pH 6.8，25°C)、2 % w/v SDS、10 % 甘油、50 mM DTT、0.01% w/v 溴酚蓝或酚红。保存在 -20ºC 或 -80ºC（长期储存）下。

产品说明

HIF-1α/2α 对照细胞提取物（未经处理的 Hep G2）：Hep G2 细胞的总细胞提取物作为阴性对照。保存在 SDS 样品缓冲液中。

HIF-1α/2α 对照细胞提取物 (Hep G2 + CoCl₂)： 经氯化钴（100 μM，24 小时）处理的 Hep G2 细胞的总细胞提取物用作阳性对照。

该裂解物对用作 HIF-1α 和 HIF-2α 蛋白的蛋白印迹对照。

背景

低氧诱导因子 1 (HIF1) 是在细胞对缺氧的反应中发挥至关重要作用的异二聚转录因子 (1)。HIF1 复合体由作为 PAS（Per、ARNT、Sim）家族碱性螺旋-环-螺旋蛋白的两个亚基 HIF-1α 和 HIF-1β 组成 (2)。HIF1 调节诸多基因类型转录，这些基因可促进低氧环境的反应，包括调节血管生成、红细胞生成、细胞周期、代谢和凋亡的基因。广泛表达的 HIF-1α 一般在常氧细胞中可通过泛素/蛋白酶体通路快速降解。在常氧条件下，HIF-1α 会发生脯氨酸羟基化，这会导致能够促进与希佩尔-林道 (VHL) 蛋白 E3 连接酶复合体结合的构象变化；随后发生泛素化和蛋白酶体降解 (3,4)。低氧条件和羟化酶化学抑制剂（如去铁敏和钴）均可抑制 HIF-1α 降解并且导致其稳定。此外，HIF-1α 可按不依赖于氧的方式，由各种细胞因子，经 PI3K-AKT-mTOR 通路诱导 (5-7)。

HIF-1β 也称作 AhR 胞核易位蛋白 (ARNT)，原因在于其具有与芳基烃受体 (AhR) 匹配以形成异二聚转录因子复合体的能力 (8)。HIF-1β 与 AhR 均可在生物异源物质代谢中发挥重要作用 (8)。此外，导致 TEL-ARNT 融合蛋白的染色体易位与急性成髓细胞性白血病相关 (9)。研究还表明，ARNT/HIF-1β 表达水平在2 型糖尿病患者的胰岛中显著下降，这表明 HIF-1β 在胰腺 β-细胞功能中发挥重要作用 (10)。

1. Sharp, F.R. and Bernaudin, M. (2004) Nat Rev Neurosci 5, 437-48.
2. Wang, G.L. et al. (1995) Proc Natl Acad Sci U S A 92, 5510-4.
3. Jaakkola, P. et al. (2001) Science 292, 468-72.
4. Maxwell, P.H. et al. (1999) Nature 399, 271-5.
5. Fukuda, R. et al. (2002) J Biol Chem 277, 38205-11.
6. Jiang, B.H. et al. (2001) Cell Growth Differ 12, 363-9.
7. Laughner, E. et al. (2001) Mol Cell Biol 21, 3995-4004.
8. Walisser, J.A. et al. (2004) Proc Natl Acad Sci U S A 101, 16677-82.
9. Salomon-Nguyen, F. et al. (2000) Proc Natl Acad Sci U S A 97, 6757-62.
10. Gunton, J.E. et al. (2005) Cell 122, 337-49.