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94790
HIF-1α/2α Control Cell Extracts
实验对照
细胞提取试剂盒

HIF-1α/2α Control Cell Extracts #94790

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  1. WB
Western Blotting Image 1: HIF-1α/2α Control Cell Extracts
使用 HIF-1α (D1S7W) XP® Rabbit mAb #36169(左图,上图)和 HIF-2α (E8E5Z) Rabbit mAb #71565(右图,上图)或 β-Actin (13E5) Rabbit mAb #4970(下图)对未经处理(-)或已经过氯化钴(100 μM,24 小时;+)处理的 HIF-1α/2α 对照细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

产品使用信息

使用前请先煮沸 3 分钟。每条泳道上样 10 µl 的未经处理或经氯喹处理的 HIF-1α/2α 对照细胞提取物。

保存

保存在SDS上样缓冲液中:含 62.5 mM Tris-HCl (pH 6.8,25°C)、2 % w/v SDS、10 % 甘油、50 mM DTT、0.01% w/v 溴酚蓝或酚红。保存在 -20ºC 或 -80ºC(长期储存)下。

产品说明

HIF-1α/2α 对照细胞提取物(未经处理的 Hep G2):Hep G2 细胞的总细胞提取物作为阴性对照。保存在 SDS 样品缓冲液中。

HIF-1α/2α 对照细胞提取物 (Hep G2 + CoCl2): 经氯化钴(100 μM,24 小时)处理的 Hep G2 细胞的总细胞提取物用作阳性对照。

该裂解物对用作 HIF-1α 和 HIF-2α 蛋白的蛋白印迹对照。

背景

低氧诱导因子 1 (HIF1) 是在细胞对缺氧的反应中发挥至关重要作用的异二聚转录因子 (1)。HIF1 复合体由作为 PAS(Per、ARNT、Sim)家族碱性螺旋-环-螺旋蛋白的两个亚基 HIF-1α 和 HIF-1β 组成 (2)。HIF1 调节诸多基因类型转录,这些基因可促进低氧环境的反应,包括调节血管生成、红细胞生成、细胞周期、代谢和凋亡的基因。广泛表达的 HIF-1α 一般在常氧细胞中可通过泛素/蛋白酶体通路快速降解。在常氧条件下,HIF-1α 会发生脯氨酸羟基化,这会导致能够促进与希佩尔-林道 (VHL) 蛋白 E3 连接酶复合体结合的构象变化;随后发生泛素化和蛋白酶体降解 (3,4)。低氧条件和羟化酶化学抑制剂(如去铁敏和钴)均可抑制 HIF-1α 降解并且导致其稳定。此外,HIF-1α 可按不依赖于氧的方式,由各种细胞因子,经 PI3K-AKT-mTOR 通路诱导 (5-7)。

HIF-1β 也称作 AhR 胞核易位蛋白 (ARNT),原因在于其具有与芳基烃受体 (AhR) 匹配以形成异二聚转录因子复合体的能力 (8)。HIF-1β 与 AhR 均可在生物异源物质代谢中发挥重要作用 (8)。此外,导致 TEL-ARNT 融合蛋白的染色体易位与急性成髓细胞性白血病相关 (9)。研究还表明,ARNT/HIF-1β 表达水平在2 型糖尿病患者的胰岛中显著下降,这表明 HIF-1β 在胰腺 β-细胞功能中发挥重要作用 (10)。
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  2. Wang, G.L. et al. (1995) Proc Natl Acad Sci U S A 92, 5510-4.
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100 µl (10 次蛋白印迹实验)

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