产品货号 | 规格 | 价格 | 库存 |
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7135C | 1 个试剂盒(96 次检测) |
反应性 | H M |
产品包括 | 体积 | 溶液颜色 | |||
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Akt Rabbit mAb Coated Microwells | 96 次测试 | ||||
Phospho-Akt (Thr308) Mouse Detection mAb | 1 个 | 绿色(冻干) | |||
Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody (ELISA Formulated) | 1 个 | 红色(冻干) | |||
Detection Antibody Diluent | 5.5 ml | 绿色 | |||
HRP Diluent | 5.5 ml | 红色 | |||
Luminol/Enhancer Solution | 3 ml | ||||
Stable Peroxide Buffer | 3 ml | ||||
ELISA Wash Buffer (20X) 9801 | 25 ml | ||||
ELISA Sample Diluent | 25 ml | 蓝色 | |||
Sealing Tape | 2 ea | ||||
Cell Lysis Buffer (10X) 9803 | 15 ml |
产品信息
PathScan® Phospho-Akt (Thr308) Chemiluminescent Sandwich ELISA Kit 是一种固相夹心酶联免疫吸附检测 (ELISA) 试剂盒,能通过化学发光读取的方式检测内源水平的磷酸-Akt (Thr308) 蛋白。与传统显色法检测相比,化学发光 ELISA 通常有更宽泛的动态范围和更高的敏感度。以低容量微孔板提供的该化学发光 ELISA, 用较小样品量便可显示出增高的信号与敏感度。Akt rabbit antibody 包被在微孔中。用细胞裂解物孵育后,该包被抗体可捕获磷酸-和非磷酸-Akt 蛋白。充分洗涤后,加入 phospho-Akt (Thr308) mouse antibody 来检测捕获的磷酸-Akt 蛋白。随后使用 Anti-mouse IgG, HRP-linked antibody 检测结合的检测抗体。添加化学发光试剂来增强信号。发光度值(按相对光单位 (RLU) 测量)与磷酸化-Akt (Thr308) 蛋白的数量成比例。
该试剂盒中的抗体为该试剂盒所特制。
注意:请参阅产品专用数据表或产品网页,以了解测定的孵育温度。这种 /产品/productDetail.jsp?productId=luminescent ELISA 提供于小体积微量平板中。样品和试剂仅需要 50 µl/微孔。
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
1X 细胞裂解缓冲液:PathScan® Sandwich ELISA Lysis Buffer (#7018) 1X:该缓冲液现成可用。这种缓冲液可保存在 4°C 下供短期使用(1-2 周)。
建议:使用前,立即添加 1 mM 苯甲基磺酰氟 (PMSF) (#8553)。
发布于 2009 年 11 月
修订于 2013 年 9 月
实验步骤编号:202
PathScan® Phospho-Akt (Thr308) Chemiluminescent Sandwich ELISA Kit #7135 可检测人和小鼠细胞中内源水平的磷酸化-Akt (Thr308)。经内部测试确定,该试剂盒可检测规定物种中的蛋白,但也可能检测其他物种的同源蛋白。
人, 小鼠
Akt 也称作 PKB 或 Rac,在控制存活和凋亡中发挥至关重要作用 (1-3)。这种蛋白激酶由胰岛素和多种生长和存活因子激活,并在涉及 PI3 激酶的 wortmannin 敏感通路中发挥作用 (2,3)。通过磷脂结合过程并由 PDK1 在 Thr308 位点磷酸化激活环 (4) ,以及通过羧基末端内部 Ser473 处的磷酸化激活 Akt。曾经功能难以捉摸的 PDK2 可在 Ser473 处磷酸化 Akt ,它被鉴定为在含 rictor 和 Sin1 的雷帕霉素中的非敏感复合体中哺乳动物雷帕霉素靶标 (mTOR) (5,6)。Akt 通过磷酸化和失活几种靶标(包括 Bad (7)、叉头转录因子 (8)、c-Raf (9) 和 caspase-9)而抑制凋亡,进而促进细胞存活。PTEN 磷酸酶是 PI3 激酶/Akt 信号转导通路的主要负向调节分子 (10)。LY294002 是特异性 PI3 激酶抑制剂 (11)。Akt 的另一个主要功能是通过磷酸化和失活 GSK-3α 和 β 调节糖原合成 (12,13)。Akt 还可以在胰岛素刺激转运葡萄糖中发挥作用 (12)。除其在存活和糖原合成中的作用外,Akt 还通过防止 GSK-3β 介导的磷酸化和 cyclin D1 降解 (14),并通过负向调节细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 p27 Kip1 (15) 和 p21 Waf1/Cip1 (16),参与细胞周期调节。Akt 还通过直接磷酸化含有 raptor 的雷帕霉素敏感性复合体中的 mTOR,在细胞生长中发挥至关重要作用 (17)。更重要的是,Akt 磷酸化并失活结节蛋白 (TSC2)(在 mTOR-raptor 复合体中 mTOR 的抑制分子)(18,19)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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