反应性 | H |
产品包括 | 容量(计数) | 溶液颜色 | |||
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FastScan™ ELISA Microwell Strip Plate, 96 Well 53257 | 1 x 96 次检测 | ||||
β-Amyloid Mouse Capture mAb | 1 x 1 次 | 绿色(冻干) | |||
β-Amyloid Rabbit HRP-linked mAb | 1 x 1 次 | 红色(冻干) | |||
FastScan™ ELISA Capture Antibody Diluent | 1 x 3 ml | 绿色 | |||
FastScan™ ELISA HRP Antibody Diluent | 1 x 3 ml | ||||
TMB Substrate 7004 | 1 x 11 ml | ||||
STOP Solution 7002 | 1 x 11 ml | ||||
Sealing Tape | 1 x 1 次 | ||||
ELISA Wash Buffer (20X) 9801 | 1 x 25 ml | ||||
FastScan™ ELISA Cell Extraction Buffer (5X) 69905 | 1 x 10 ml | ||||
FastScan™ ELISA Cell Extraction Enhancer Solution (50X) 25243 | 1 x 1 ml | ||||
FastScan™ ELISA Kit #44261 Positive Control Type 2 | 1 x 1 次 |
产品信息
注意:用去离子水/纯净水或等效水制备溶液。
仅制备实验当天所需的足够试剂。
*重要提示:提供的 FastScan™ ELISA 细胞提取增强剂溶液 (50X) 保存在 4°C 下时可能会产生沉淀。要溶解,则在 37°C 下短暂加热并轻轻混合。FastScan™ ELISA 细胞提取增强剂溶液 (50X) 可保存在室温下,以避免沉淀。
注:1X 细胞提取缓冲液含有磷酸酶抑制剂。应在裂解细胞之前立即将蛋白酶抑制剂加入 1X 细胞提取缓冲液中。还可添加其他磷酸酶抑制剂(例如蛋白酶/磷酸酶抑制剂混合物 (100X) #5872,未提供)。
注意:一定数量的 FastScan™ ELISA 试剂盒不包含阳性对照,请参考数据表上的产品内含试剂表,了解所含试剂列表。如果您对如何产生这些试剂盒的阳性对照需要支持,请联系 CST 技术支持 (support@cellsignal.com)。
对于贴壁细胞
对于悬浮细胞
注:在运行检测之前,请将所有材料和已制备的试剂平衡至室温。
*注:某些 FastScan™ ELISA Kit 可能需要在这个步骤额外洗涤。任何额外洗涤的要求都将在试剂盒数据表的产品“说明”中特别注明。
注意:阳性反应的初始颜色为蓝色,一旦添加 STOP 溶液,就变为黄色。
发布于 2018 年 5 月
修订于 2019 年 11 月
实验步骤编号:1924
FastScan™ β-Amyloid ELISA Kit 是一种夹心酶联免疫吸附剂检测 (ELISA) 试剂盒,能检测 β-淀粉样蛋白的内源水平。要进行这种检测,样品用一种偶联专有标签的捕获抗体以及一种偶联 HRP 的检测二抗孵育,从而在溶液中与 β-淀粉样蛋白形成一个夹心结构。这整个复合体用一种抗标签抗体固定在平板上。随后洗涤各孔以清除未结合的物质。然后添加 TMB。观察到的信号振幅与 β-淀粉样蛋白的量成比例。
* 试剂盒中的抗体为针对该试剂盒的定制制剂。
FastScan™ β-Amyloid ELISA Kit 可检测 β-淀粉样蛋白的内源水平,如结果图 1 所示。经内部测试确定,该试剂盒可检测规定物种中的蛋白,但也可能检测其他物种的同源蛋白。
人
β 淀粉样蛋白 (Aβ) 前体蛋白 (APP) 是一种 100-140 kDa 跨膜糖蛋白,拥有多个同工型 (1)。APP 的氨基酸序列中所包含的淀粉样蛋白结构域能够通过两步蛋白剪切反应得到释放 (1)。释出的 A-β 片段在细胞外沉积积累,形成阿尔茨海默病中淀粉样斑块中主要的组分 (1)。APP 可在多个位点被磷酸化,这会影响蛋白本身的裂解加工和分泌过程 (2-5)。周期素依赖性激酶在 Thr668(APP695 同工型对应的位点)的磷酸化依赖于细胞周期,并在 G2/M 期达到峰值 (4)。在 Thr668 位点被磷酸化的 APP 存在于成年大鼠大脑中,且与培养的神经细胞的分化有关 (5,6)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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