对促销活动感兴趣？ | 单击此处 >>
5037
SimpleChIP® Human γ-Actin Promoter Primers
ChIP 试剂盒与试剂
引物组
  1. 产品
  2. ChIP 试剂盒与试剂
  3. SimpleChIP® Human γ-Actin Promoter Primers

SimpleChIP® Human γ-Actin Promoter Primers #5037

引用 (0)
筛选器：
  1. ChIP
Chromatin Immunoprecipitation Image 1: SimpleChIP® Human γ-Actin Promoter Primers
使用 SimpleChIP® Human γ-Actin Promoter Primers 进行实时 PCR 反应可获得 PCR 产物熔解曲线。数据显示为使用 20 ng 总 DNA 进行的两次重复 PCR 反应。溶解曲线由 80 个熔化期组成，从 55°C 开始，每个周期增加 0.5°C。每个 PCR 产物降解时会形成一个吸收峰。
Chromatin Immunoprecipitation Image 2: SimpleChIP® Human γ-Actin Promoter Primers
对使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 从交联细胞中分离的 DNA 检测 SimpleChIP® Human γ-Actin Promoter Primers。使用实时 PCR 检测系统和 SYBR® Green 反应混合物，对梯度稀释的 2% 总输入 DNA（20 ng、4 ng、0.8 ng 和 0.16 ng）重复进行实时 PCR。根据 40 个实时 PCR（在 95°C 下变性 15 秒钟，在 65°C 下退火/延伸 60 秒钟）周期期间每份稀释样品的相应循环阈值 (CT)，计算 PCR 扩增效率 (E) 和相关系数 (R2)。
图像库
了解有关我们如何获得图像的详情
To Purchase # 5037S
目录# 规格 价格 库存
5037S		 500 µl （250 次 PCR 反应）

定制制剂

重要订购明细

客户订购明细： 产品订购后即配制。请为产品加工时间预留 3 个工作日。

支持数据

反应性 H

应用缩写：

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术
  • E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性缩写：

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品说明

SimpleChIP® Human γ-Actin Promoter Primers 包含一个针对人 γ 肌动蛋白启动子某个区域特异的正向和反向 PCR 引物混合物。这些引物可用于扩增经染色质免疫沉淀法 (ChIP) 分离的 DNA。引物经优化可用于 SYBR® Green 定量实时 PCR，并连同 Cell Signaling Technology® 的 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kits #9002 和 #9003 以及经 ChIP 验证的抗体进行了测试。γ-肌动蛋白基因在所有细胞类型中活跃转录，其启动子的高度富集可促进与活跃转录有关的组蛋白修饰，如组蛋白 H3 Lys4 三甲基化和一般组蛋白乙酰化。该基因启动子显示，与异染色质有关的组蛋白修饰（如组蛋白 H3 Lys9 或 Lys27 三甲基化）水平非常低。

产品使用信息

1. 标记适量与要使用的实时 PCR 仪器型号相适应的相应 PCR 试管或 PCR 平板数量。PCR 反应（的每一个样品）应以重复一次的方式进行，并应包含一只不含 DNA 且用于观察污染的试管，以及梯度稀释的 2% 总输入染色质 DNA（未稀释、1:5、1:25、1:125）以用于生成标准曲线并确定扩增效率。2. 向每只试管或 PCR 平板的每个孔添加 2 μl 相应 ChIP DNA 样品。

3. 按下文所述制备主 PCR 反应混合物。额外足量配置两个反应的试剂以弥补分管时的体积损失。向每只PCR 反应试管或 PCR 平板的每个孔添加 18 μl 主 PCR 反应混合物。

1 次 PCR 反应的试剂量 (20 μl)

不含核酸酶的 H2O 6 μl

5 μM SimpleChIP® Primers 2 μl

2X SYBR® Green Reaction Mix 10 μl

4. 启动以下 PCR 反应程序：

a. 初始变性：在 95°C 下进行 3 分钟。

b. 变性：在 95°C 下进行 15 秒钟。c. 退火和延伸：在引物特定温度下进行 60 秒钟。

d. 重复步骤 b 和 c，共循环 40 次。

5. 使用实时 PCR 仪器提供的软件分析定量 PCR 结果。

保存

保存在浓度为 5 μM（每种引物的最终浓度为 5 μM）的无核酸酶水中。储存于 -20°C 的温度下。

特异性/灵敏度

物种反应性：

人

背景

染色质免疫沉淀 (ChIP) 测定法是一种用于在细胞天然染色质背景下探测蛋白质-DNA 相互作用的强大的通用技术 (1,2)。这种测定法用于检测与基因组某个特定区域有关的多种蛋白，或检测某种特殊蛋白结合的基因组的多个区域 (3-6)。ChIP 可用于确定各种蛋白被募集到某个基因启动子上的特定顺序，或用于“测定”整个基因位点上某种特定组蛋白修饰的相对数量 (3,4)。除了组蛋白外，ChIP 测定法还可用于分析转录因子与辅助因子、DNA 复制因子和 DNA 修复蛋白的结合。进行 ChIP 检测时，细胞首先用甲醛固定，甲醛是一种可逆的蛋白-DNA 交联剂，可以“维持”细胞内发生的蛋白-DNA 相互作用 (1,2)。细胞进行裂解，染色质采集后使用超声处理或酶消化法进行碎裂。碎裂的染色质随后使用对某种特殊蛋白或组蛋白修饰具有特异性的抗体进行免疫沉淀。任何与目标蛋白或组蛋白修饰有关的 DNA 序列都会作为交联染色质复合体的一部分进行共沉淀，并且该 DNA 序列的相对数量会在免疫选择过程中达到富集。免疫沉淀后，蛋白质-DNA 交联被逆转，DNA 得以纯化。标准 PCR 或定量实时 PCR 常用于测量通过蛋白特异性免疫沉淀达到富集的特定 DNA 序列数量 (1,2)。或者，ChIP 测定法还可与基因组微芯片（芯片上的 ChIP）技术、高通测序 (ChIP-Seq) 或克隆策略联合使用，它们都能对蛋白-DNA 相互作用和组蛋白修饰进行全基因组分析 (5-8)。SimpleChIP® 引物经优化可用于通过实时定量 PCR 扩增 ChIP 分离的 DNA，并提供用于确认 ChIP 试验是否成功的重要阳性和阴性对照。
  1. Orlando, V. (2000) Trends Biochem Sci 25, 99-104.
  2. Kuo, M.H. and Allis, C.D. (1999) Methods 19, 425-33.
  3. Agalioti, T. et al. (2000) Cell 103, 667-78.
  4. Soutoglou, E. and Talianidis, I. (2002) Science 295, 1901-4.
  5. Mikkelsen, T.S. et al. (2007) Nature 448, 553-60.
  6. Lee, T.I. et al. (2006) Cell 125, 301-13.
  7. Weinmann, A.S. and Farnham, P.J. (2002) Methods 26, 37-47.
  8. Wells, J. and Farnham, P.J. (2002) Methods 26, 48-56.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

限制使用

除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意，否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件，除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受， 否书均被拒书，并且无效。

专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明， 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的， 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专，且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的， 或专专售（专独或作专专成）或其他商专目的而专专专品，均需要 CST 的专独专可。客专：(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品，或使用专品制造任何商专专品，(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专，或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专， (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专，(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品， (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专

仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
SimpleChIP 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。
SYBR 是 Molecular Probes, Inc 的注册商标。
Powered by Translations.com GlobalLink OneLink SoftwarePowered By OneLink