我们有一个新的 URL!www.cellsignal.cn | 点击了解更多 >>
7440
HTScan® Met Kinase Assay Kit
细胞检测试剂盒
检测试剂盒

HTScan® Met Kinase Assay Kit #7440

引用 (0)
other Image 1 - HTScan® Met Kinase Assay Kit

图 3. Met 激酶活性的剂量依赖性曲线:使用 Phospho-Tyrosine mAb (P-Tyr-100) #9411 检测 Met 激酶对底物肽 (#1315) 的磷酸化可产生 DELFIA® 数据。在 50 µl 反应体积中,每个反应孔在 25ºC 下用数量递增的 Met 和 1.5 µM 底物肽反应 30 分钟。(DELFIA® 是 PerkinElmer, Inc. 的一个注册商标)。

other Image 2 - HTScan® Met Kinase Assay Kit

图 5. Staurosporine 会抑制 Met 激酶活性:使用 Phospho-Tyrosine mAb (P-Tyr-100) #9411 检测 Met 激酶对 Met 底物肽 (#1315) 的磷酸化可产生 DELFIA® 数据。在 50 µl 反应体积中,每个反应孔在室温下用 50 ng Met、1.5 µM 底物肽、20 µM ATP 和数量递增的 staurosporine 反应 30 分钟。(DELFIA® 是 PerkinElmer, Inc. 的一个注册商标)。

other Image 3 - HTScan® Met Kinase Assay Kit

图 4. Met 激酶活性的肽浓度依赖性:使用 Phospho-Tyrosine mAb (P-Tyr-100) #9411 检测 MET 激酶对底物肽 (#1315) 的磷酸化可产生 DELFIA® 数据。在 50 µl 反应体积中,每个反应孔在室温下用 50 ng Met 和浓度递增的底物肽反应 30 分钟。(DELFIA® 是 PerkinElmer, Inc. 的一个注册商标)。

other Image 4 - HTScan® Met Kinase Assay Kit

图 2. Met 激酶活性的时程:使用 Phospho-Tyrosine mAb (P-Tyr-100) #9411 检测 Met 激酶对 Met 底物肽 (#1315) 的磷酸化可产生 DELFIA® 数据。在 50 µl 反应体积中,每个反应孔用 50 ng 和 1.5 µM 底物肽。(DELFIA® 是 PerkinElmer, Inc. 的一个注册商标)。

other Image 5 - HTScan® Met Kinase Assay Kit

图 1. 在使用以下反应条件的放射检测中可检测 Met 激酶活性:60 mM HEPES-NaOH (pH 7.5)、3 mM MgCl2、3 mM MnCl2、3 µM 原钒酸钠、1.2 mM DTT、ATP(可变)、2.5 µg/50 µl PEG20.000,底物:PolyAEKY1.5 µg/50 µl,重组 Met:50 µg/50 µl。

产品说明

该试剂盒提供一种方法来使用重组人 Met 激酶进行激酶活性检测。它包含活化的 Met 激酶(以 GST 融合蛋白的形式保存)、生物素化肽底物以及用于检测磷酸化底物肽的磷酸化酪氨酸抗体。

分子式

Peptide substrate, Biotin-Pyk2 (402):2,166 道尔顿。GST-Met:78 kDa。

背景

Met 是肝细胞生长因子(HGF,也称散射因子)的一种高亲和性酪氨酸激酶受体,也是一种由 45 kDa α 和 145 kDa β 亚基构成的二硫键连接异二聚体 (1,2)。α-亚基和 β-亚基的氨基末端区域构成胞外域。β-链的剩余部分横跨质膜,包含一个具有酪氨酸激酶活性的胞质区。Met 与 HGF 相互作用会导致多个酪氨酸自磷酸化,继而募集多种下游信号转导组分,包括 Gab1、c-Cbl 和 PI3 激酶 (3)。这一系列基础活动对于所有与 Met 激酶活性相关的生物功能十分重要。加入细胞质 Tyr1003 位点的磷酸盐对于 Met 蛋白质泛素化和降解十分必要 (4)。Met 激酶结构域中在 Tyr1234/1235 位点的磷酸化对于激酶激活十分关键。Met 胞质域中在 Tyr1349 位点的磷酸化为 Gab1 提供一个直接结合位点 (5)。研究表明,在肾癌、结肠癌和乳腺癌等多种癌症中发现 Met 水平和/或酪氨酸激酶活性发生变化。因此,研究人员得出结论,Met 是一个具有吸引力的潜在癌症诊治靶标 (6,7)。

  1. Cooper, C.S. et al. Nature 311, 29-33.
  2. Bottaro, D.P. et al. (1991) Science 251, 802-4.
  3. Bardelli, A. et al. (1997) Oncogene 15, 3103-11.
  4. Taher, T.E. et al. (2002) J Immunol 169, 3793-800.
  5. Schaeper, U. et al. (2000) J Cell Biol 149, 1419-32.
  6. Eder, J.P. et al. (2009) Clin Cancer Res 15, 2207-14.
  7. Sattler, M. and Salgia, R. (2009) Update Cancer Ther 3, 109-118.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
DELFIA 为 PerkinElmer 公司的注册商标
Powered by Translations.com GlobalLink OneLink SoftwarePowered By OneLink