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7752
HTScan® Jak2 Kinase Assay Kit
细胞检测试剂盒
检测试剂盒

HTScan® Jak2 Kinase Assay Kit #7752

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图 3. Jak2 激酶活性的剂量依赖性曲线:使用 Phospho-Tyrosine mAb (P-Tyr-100) #9411 检测 Jak2 激酶对底物肽 (#1305) 的磷酸化可产生 DELFIA® 数据。在 50 µl 反应体积中,每个反应孔在室温下用数量递增的 Jak2 和 1.5 µM 底物肽反应 30 分钟。(DELFIA® 是 PerkinElmer, Inc. 的一个注册商标)。

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图 5. Staurosporine 会抑制 Jak2 激酶活性:使用 Phospho-Tyrosine mAb (P-Tyr-100) #9411 检测 Jak2 激酶对 Jak2 底物肽 (#1305) 的磷酸化可产生 DELFIA® 数据。在 50 µl 反应体积中,每个反应孔在室温下用 100 ng Jak2、1.5 µM 底物肽、20 µM ATP 和数量递增的 staurosporine 反应 30 分钟。(DELFIA® 是 PerkinElmer, Inc. 的一个注册商标)。

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图 4. Jak2 激酶活性的肽浓度依赖性:使用 Phospho-Tyrosine mAb (P-Tyr-100) 检测 Jak2 激酶对底物肽 (#1305) 的磷酸化可产生 DELFIA® 数据。在 50 µl 反应体积中,每个反应孔在室温下用 100 ng Jak2 和浓度递增的底物肽反应 30 分钟。(DELFIA® 是 PerkinElmer, Inc. 的一个注册商标)。

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图 2. Jak2 激酶活性的时程:使用 Phospho-Tyrosine mAb (P-Tyr-100) 检测 Jak2 激酶对 Jak2 底物肽 (#1305) 的磷酸化可产生 DELFIA® 数据。在 50 µl 反应体积中,每个反应孔用 100 ng Jak2 和 1.5 µM 底物肽。(DELFIA® 是 PerkinElmer, Inc. 的一个注册商标)。

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图 1. 在使用以下反应条件的放射性同位素滤膜结合测定法中可检测 Jak2 激酶活性:60 mM HEPES-NaOH (pH 7.5)、3 mM MgCl2、3 mM MnCl2、3 µM 原钒酸钠、1.2 mM DTT、ATP(可变)、2.5 µg/50 µl PEG20.000,底物:Tetra (LRRWSLG) 5 µg/50 µl,重组 Jak2:50 ng/50 µl。

产品说明

该试剂盒提供一种方法来使用重组小鼠 Jak2 激酶进行激酶活性检测。它包含活化的 Jak2 激酶(以 GST 融合蛋白的形式保存)、生物素化肽底物以及用于检测磷酸化底物肽的磷酸化酪氨酸抗体。

分子式

FLT3 (Tyr589):1,945 道尔顿;GST-Jak2 激酶:71 kDa 道尔顿。

背景

酪氨酸激酶的 Janus 家族成员 (Jak1, Jak2, Jak3 和 Tyk2) 通过配体结合一定数量的相关细胞因子受体 (1) 而被激活。在细胞因子受体被激活时,Jak 蛋白自磷酸化并磷酸化相关的受体,从而为信号转导蛋白提供多个结合位点。这些相关的信号转导蛋白,例如 Stats (2)、Shc (3)、胰岛素受体底物(4) 和黏着斑激酶 (FAK) (5) ,通常含有 SH2 或者其它的磷酸 - 酪氨酸结合结构域。

  1. Leonard, W.J. and O'Shea, J.J. (1998) Annu Rev Immunol 16, 293-322.
  2. Darnell, J.E. (1997) Science 277, 1630-5.
  3. VanderKuur, J. et al. (1995) J Biol Chem 270, 7587-93.
  4. Argetsinger, L.S. et al. (1995) J Biol Chem 270, 14685-92.
  5. Zhu, T. et al. (1998) J Biol Chem 273, 10682-9.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
DELFIA 为 PerkinElmer 公司的注册商标
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