我们有一个新的 URL!www.cellsignal.cn | 点击了解更多 >>
8816
Active Arf1 Detection Kit
细胞检测试剂盒
检测试剂盒

Active Arf1 Detection Kit #8816

引用 (0)
other Image 1 - Active Arf1 Detection Kit

图 2. 如图所示,GTP 结合 GTP 酶沉淀过程可分为 3 个步骤。第 1 步:在旋转杯中混合样品、结合蛋白和谷胱甘肽树脂,并在 4ºC 下孵育,以使 GTP 结合的 GTP 酶通过 GST 连接的结合蛋白与谷胱甘肽树脂结合。第 2 步:通过离心分离去除未结合的蛋白。第 3 步:用 SDS 缓冲液洗脱结合谷胱甘肽树脂的 GTP 酶。洗脱样品随后通过蛋白质印迹实验进行分析。

保存

GTPγS:保存在 -80°C 下 GDP:保存在 -80°C 下 GST-GGA3-PBD:保存在 -80°C 下 裂解/结合/洗涤缓冲液:保存在 4°C 下 谷胱甘肽树脂:保存在 4°C 下 SDS 样品缓冲液:保存在 4°C 下 旋转杯和采样管:保存在 4°C 下 Arf1 Rabbit mAb:保存在 -20° 下

产品说明

Active Arf1 Detection Kit 提供检测细胞中 Arf1 GTP 酶激活所必需的所有试剂。GST-GGA3-PBD 融合蛋白用于结合活化形式的 GTP 结合 Arf1,该 GTP 结合 Arf1 随后可用谷胱甘肽树脂进行免疫沉淀。随后使用 Arf1 Rabbit mAb 进行蛋白质印迹实验来确定 Arf1 激活水平。

特异性/敏感性

Active Arf1 Detection Kit 可检测内源水平的 GTP 结合(活化)Arf1,如图 1 所示。经内部测试确定,该试剂盒可检测规定物种中的蛋白,但也可能检测其他物种的同源蛋白。

背景

小 GTP 结合蛋白(G 蛋白)Ras 超家族包含一大类蛋白(超过 150 个成员),根据它们的序列和功能相似性,可分为至少五个家族:Ras、Rho、Rab、Arf 和 Ran (1-3)。这些小 G 蛋白均有 GDP/GTP 结合及 GTP 酶活性,并在各种细胞和发育活动中作为双向转换器发挥作用,这些活动包括细胞周期进程、细胞存活、肌动蛋白细胞骨架组织、细胞极性和运动以及囊泡和胞核转运 (1)。上游信号会刺激 GDP 结合形式(失活)解离 GDP,导致 GTP 结合及 GTP 结合形式(活化)的形成。活化 G 蛋白随后在其下游效应子结合区域发生构象变化,从而结合并调节下游效应子。固有 GTP 酶活性会阻断这种激活,使 GTP 水解成 GDP 并释放下游效应子。Ras 超家族蛋白的这些固有鸟嘌呤核苷酸交换和 GTP 水解活性还受鸟嘌呤核苷酸交换因子 (GEF) 的调控,GEF 会促进活化 GTP 结合形式和 GTP 酶激活蛋白 (GAP) 的形成,从而将 GTP 酶还原成失活的 GDP 结合形式 (4)。

ADP 核糖基化因子 (Arf) 蛋白是低分子量 GTP 结合蛋白,属于 Ras GTP 酶超家族。根据氨基酸序列和结构相似性,Arf 蛋白可分为三个不同类别。Arf1 属于 I 类 Arf 蛋白,与高尔基体上的囊泡芽生有关 (1)。

  1. Takai, Y. et al. (2001) Physiol Rev 81, 153-208.
  2. Colicelli, J. (2004) Sci STKE 2004, RE13.
  3. Wennerberg, K. et al. (2005) J Cell Sci 118, 843-6.
  4. Vigil, D. et al. (2010) Nat Rev Cancer 10, 842-57.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
LumiGLO 是 Kirkegaard & Perry Laboratories 的注册商标。
Powered by Translations.com GlobalLink OneLink SoftwarePowered By OneLink