Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
93941S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | M R |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Rabbit IgG |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
小鼠, 大鼠
通过采用与小鼠 S100A9 蛋白的 Asn98 周围的残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
S100A8 和 S100A9 是钙结合蛋白,可形成存在于单核细胞、中性粒细胞、巨噬细胞以及一些上皮细胞中的非共价异二聚体 (1,2)。S100A8 和 S100A9 由微管蛋白依赖性机制在炎性病情期间分泌而来,具有抗菌和趋化功能 (3-5)。胞外 S100A8/S100A9 还会诱导内皮细胞出现炎症反应,包括诱导促炎性趋化因子和黏附分子以及增加血管通透性 (6)。S100A8/S100A9 会诱导并募集带瘤小鼠的骨髓源性抑制细胞 (MDSC) (7)。MDSC 可自行产生其他 S100A8/S100A9,从而形成维持 MDSC 聚集的正反馈机制 (7)。S100A8/S100A9 还在银屑病皮肤细胞中高表达,它直接使补体蛋白 C3 的转录上调,从而导致疾病 (8)。此外,肿瘤浸润骨髓细胞会诱导癌细胞中 S100A8 和 S100A9 的表达,从而增加侵袭性和转移性 (9)。
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