查看特别推荐 >>
37182
Ras (E4K9L) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
抗体偶联物
单克隆抗体

Ras (E4K9L) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate) #37182

引用 (0)
筛选器:
  1. IF
Immunofluorescence Image 1: Ras (E4K9L) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
使用 Ras (E4K9L) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)(红色)对小鼠结肠细胞(左图)和肾细胞(右图)进行共聚焦免疫荧光分析。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。
Immunofluorescence Image 2: Ras (E4K9L) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
使用 Ras (E4K9L) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)(红色)对小鼠胰腺细胞(左图)和肝细胞(右图)进行共聚焦免疫荧光分析。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。
Immunofluorescence Image 1: Ras (E4K9L) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
使用 Ras (E4K9L) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)(红色)对 BEN 细胞(左图,高表达)和 MDA-MB-468 细胞(右图,低表达)进行共聚焦免疫荧光分析。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。
To Purchase # 37182S
目录# 规格 价格 库存
37182S
100 µl (50 次检测)

支持性数据

反应性 H M R Mk
灵敏度 内源性
MW (kDa)
来源/同种型 兔 IgG

应用关键词:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品说明

Cell Signaling Technology 的这种抗体接合 Alexa Fluor ® 647荧光染料,并对小鼠组织和人细胞进行了直接的免疫荧光分析内部检测。该抗体显示的物种交叉反应性预计与非偶联的 Ras (E4K9L) Rabbit mAb #91054 相同。

产品使用信息

应用 稀释度
免疫荧光法(冰冻) 1:50 - 1:100
免疫荧光法(免疫细胞化学) 1:50 - 1:100

保存

保存在 PBS(pH 为 7.2)、低于 0.1 % 的叠氮化钠和 2 mg/ml BSA 中。4°C 保存。切勿分装抗体。避光保存。切勿冷冻。

实验步骤

打印

查看 > 收起 >

免疫荧光法(冰冻)

A. 溶液与试剂

:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。

  1. 20 X 磷酸盐缓冲液 (PBS): (9808) 要制备 1L 1X PBS:添加 50 ml 20X PBS 至 950 ml dH2O 中并混合。调节 pH 至 8.0。
  2. 甲醛:16%,无甲醇,Polysciences 公司生产。(cat# 18814),使用新鲜制剂,小瓶打开后在 4°C 避光保存,同时在 1X PBS 中稀释使用。
  3. 封闭液 (1X PBS / 5% normal goat serum (#5425) / 0.3% Triton™ X-100):要配制 10 ml:添加 0.5 ml normal goat serum 和 0.5 ml 20X PBS 到 9.0 ml dH2O 中,混匀。搅拌时加入 30 µl Triton™ X-100。
  4. 抗体稀释缓冲液: (1X PBS / 1% BSA / 0.3% Triton™ X-100):要制备 10 ml,添加 30 µl Triton™ X-100 至 10 ml 1X PBS 中。充分混合后,添加 0.1 g BSA (#9998),并混合。
  5. Prolong® Gold AntiFade Reagent (#9071),Prolong® Gold AntiFade Reagent with DAPI (#8961)。

B. 样品制备 - 冰冻/恒冷箱切片 (IF-F)

  1. 冰冻固定组织进行免疫染色(C 部分)。
  2. 对新鲜未固定的冰冻组织,请立刻按下列步骤固定:
    1. 切片用 1X PBS 中稀释的 4% 甲醛浸没。

      注意:甲醛有毒性,仅可在通风橱中使用。

    2. 室温下固定切片 15 分钟。
    3. 吸干液体后用 1X PBS 冲洗三次,每次 5 分钟。
    4. 继续进行免疫染色操作(C 部分)。

C. 免疫染色

注意:所有随后的孵育都应当在室温下完成,除非另有注明需要在避光湿盒或带盖的培养皿/板中孵育,以防止干燥和荧光物质淬灭。

  1. 在封闭缓冲液中封闭标本 60 分钟。
  2. 封闭标本时,按照产品网页实验步骤中推荐的稀释比例,在抗体稀释缓冲液中配制一抗。
  3. 吸去封闭缓冲液,加入稀释后的一抗。
  4. 4°C 孵育过夜。
  5. 用 1X PBS 漂洗三次,每次 5 分钟。
  6. 使用 Prolong® Gold Antifade Reagent (#9071) 或 Prolong® Gold Antifade Reagent with DAPI (#8961) ,用盖玻片盖住切片。
  7. 要达到最佳效果,使用封片液室温过夜。将切片平放避光 4°C 环境下,可长期保存。

发布​时间 2006 年 11 月

修订时间 2013 年 11 月

实验步骤编号:222

免疫荧光法(免疫细胞化学)

A. 溶液与试剂

:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。

  1. 20 X 磷酸盐缓冲液 (PBS): (9808) 要制备 1L 1X PBS:添加 50 ml 20X PBS 至 950 ml dH2O 中并混合。调节 pH 至 8.0。
  2. 甲醛:16%,无甲醇,Polysciences 公司生产。(cat# 18814),使用新鲜制剂,小瓶打开后在 4°C 避光保存,同时在 1X PBS 中稀释使用。
  3. 封闭液 (1X PBS / 5% normal goat serum (#5425) / 0.3% Triton™ X-100):要配制 10 ml:添加 0.5 ml normal goat serum 和 0.5 ml 20X PBS 到 9.0 ml dH2O 中,混匀。搅拌时加入 30 µl Triton™ X-100。
  4. 抗体稀释缓冲液: (1X PBS / 1% BSA / 0.3% Triton™ X-100):要制备 10 ml,添加 30 µl Triton™ X-100 至 10 ml 1X PBS 中。充分混合后,添加 0.1 g BSA (#9998),并混合。
  5. Prolong® Gold AntiFade Reagent (#9071),Prolong® Gold AntiFade Reagent with DAPI (#8961)。

B. 标本制备 - 培养细胞系 (IF-IC)

注意:细胞应当在多孔板、腔室玻片或盖玻片上直接培养、处理、固定和染色。

  1. 吸干液体,随后在细胞上覆盖一层 2–3 mm 用 1X PBS 稀释的 4% 甲醛。

    注意:甲醛有毒性,需在通风橱中使用。

  2. 室温下固定细胞 15 分钟。
  3. 吸干固定液,用 1X PBS 漂洗三次,每次 5 分钟。
  4. 继续进行免疫染色操作(C 部分)。

C. 免疫染色

注意:所有随后的孵育都应当在室温下完成,除非另有注明需要在避光湿盒或带盖的培养皿/板中孵育,以防止干燥和荧光物质淬灭。

  1. 在封闭缓冲液中封闭标本 60 分钟。
  2. 封闭时,按产品网页中列出的抗体稀释缓冲液中稀释来制备一抗。
  3. 吸去封闭缓冲液,加入稀释后的一抗。
  4. 4°C 孵育过夜。
  5. 用 1X PBS 漂洗三次,每次 5 分钟。
  6. 使用 Prolong® Gold Antifade Reagent (#9071) 或 Prolong® Gold Antifade Reagent with DAPI (#8961) ,用盖玻片盖住切片。
  7. 要达到最佳效果,使用封片液室温过夜。将切片平放避光 4°C 环境下,可长期保存。

发布​时间 2006 年 11 月

修订时间 2013 年 11 月

实验步骤编号:182

特异性/灵敏度

Ras (E4K9L) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate) 可检测 K-Ras、H-Ras 和 N-Ras 总蛋白的内源水平。

物种反应性:

人, 小鼠, 大鼠, 猴

来源/纯化

使用与人 K-Ras 蛋白中 Glu37 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

21 kDa 鸟嘌呤-核苷酸结合蛋白(K-Ras、H-Ras 和 N-Ras)在活化(GTP 结合)和失活(GDP 结合)形式之间循环 (1)。受体酪氨酸激酶和 G 蛋白偶联受体激活 Ras,随后刺激 Raf-MEK-MAPK 通路 (2-4)。GTP 酶激活蛋白 (GAP) 通常可使 Ras 失活。但研究表明,在 30% 的人肿瘤中,Ras 点突变可防止该通路发生 GAP 介导的抑制 (5)。肿瘤中最常见的致癌性 Ras 突变是 Gly12 突变为 Asp12 (G12D),有可能通过增加蛋白的整体刚性防止 Ras 失活 (5,6)。
  1. Boguski, M.S. and McCormick, F. (1993) Nature 366, 643-54.
  2. Avruch, J. et al. (1994) Trends Biochem Sci 19, 279-83.
  3. Buday, L. and Downward, J. (1993) Cell 73, 611-20.
  4. Huang, D.C. et al. (1993) Mol Cell Biol 13, 2420-31.
  5. Bos, J.L. (1989) Cancer Res 49, 4682-9.
  6. Ma, J. and Karplus, M. (1997) J Mol Biol 274, 114-31.

通路与蛋白质

探索与本产品相关的通路 + 蛋白质。

限制使用

除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意,否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件,除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受, 否书均被拒书,并且无效。

专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明, 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的, 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专,且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的, 或专专售(专独或作专专成)或其他商专目的而专专专品,均需要 CST 的专独专可。客专:(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品,或使用专品制造任何商专专品,(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专,或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专, (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专,(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品, (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专

仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
ProLong 是 Life Technologies 公司的注册商标。
本产品依据源于 Life Technologies Corporation 的知识产权许可提供。本产品的转让条件为买方仅在买方开展的研究中使用所购买的产品,不包括合同研究或任何服务收费研究,并且买方不得 (1) 将本产品或其组分用于以下方面:(a) 用于诊断、诊疗或预防目的;(b) 用于检测、分析或筛选服务或获得信息,以按检测收取报酬;或 (c) 用于制造或质量保证或质量控制,和/或 (2) 销售或转让本产品或其组分用于转售,无论是否转售供研究使用。如需了解有关购买本品用于除如上所述之外目的的许可信息,请联系 Life Technologies Corporation(地址:5791Van Allen Way, Carlsbad, CA 92008 USA)或 [电子邮件受保护]
Powered by Translations.com GlobalLink OneLink SoftwarePowered By OneLink