反应性 | H M R Mk |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
流式细胞术(固定/通透) | 1:50 |
本实验步骤中所需的所有试剂可与我们的 Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593 一起高效购买,或使用下文所列的货号单独购买。
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
注:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活力指示染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品网页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经验证用于流式细胞术的细胞染料完整列表。
注:固定前,贴壁细胞或组织应予以解离并处于单细胞悬液中。
注:最佳离心条件会根据细胞类型和试剂容量变动。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀下来。
注:如果使用全血,则在固定前裂解红细胞并通过离心来洗涤。
注:如果表位被甲醛和/或甲醇破坏,可以在固定前添加靶向 CD 标记物或其他胞外蛋白质的抗体。在固定和透化过程期间,这类抗体将保持与目的靶标结合。但注意,某些荧光团(包括 PE 和 APC)会被甲醇损坏,因此不应在透化前添加。如果您不确定,请进行小规模实验。
注:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
发布时间 2009 年 7 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:407
人, 小鼠, 大鼠, 猴
使用与人 ATF-2 蛋白中 Thr71 周围残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
转录因子 ATF-2(也被称为 CRE-BP1)结合 AP-1 和 CRE DNA 效应元件,同时也是亮氨酸拉链蛋白家族 ATF/CREB 的一员 (1)。ATF-2 与各种病毒癌蛋白以及细胞抑癌基因相互作用,并且是 SAPK/JNK 和 p38 MAP 激酶信号转导通路的靶标 (2-4)。各种细胞应激(包括基因毒剂、炎性细胞因子和紫外辐射)都能刺激 ATF-2 的转录活性。细胞应激通过在 Thr69 和 Thr71 的磷酸化激活 ATF-2 (2-4)。在体内和经 ATF-2 转染的细胞内,SAPK 和 p38 MAPK 能在这些位点磷酸化 ATF-2。这些位点的突变导致应激诱导的 ATF-2 转录缺失 (2-4)。此外,这些位点的突变会降低 E1A 和 Rb 通过ATF-2 刺激基因表达的能力 (2)。
ATF-7 是亮氨酸拉链蛋白(5) ATF/CREB 家族的另一个成员 。同样,Thr51 和 Thr53(分别对应 ATF-2 的 Thr69 和 Thr71)可在不同条件下被磷酸化 (6,7)。
探索与本品相关的通路。
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