反应性 | 所有物种 |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | |
来源/亚型 | 兔 IgG |
产品信息
Cell Signaling Technology 的这种抗体通过其氨基基团偶联辣根过氧化物酶 (HRP) 的氨基酸基团。该 HRP 偶联抗体的物种交叉反应性预计与非偶联的 Mono-Methyl Arginine [mme-R] MultiMab™ Rabbit mAb #8015 相同。
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
保存在 136 mM NaCl、2.6 mM KCI、12 mM 磷酸氢二钠 (pH 为 7.4) 、2 mg/ml BSA 和 50 % 甘油中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。
要进行蛋白质印迹法分析,在 4°C 下,将膜与稀释的一抗放在 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中一起孵育,轻晃孵育一整夜。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#13953,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:264
Mono-Methyl Arginine [mme-R] MultiMab™ Rabbit mAb mix (HRP Conjugate) 可识别内源水平的单甲基精氨酸蛋白。是一种无序列偏好的常见单甲基精氨酸基序抗体,不与二甲基精氨酸或未甲基化的精氨酸发生交叉反应。
预期的所有物种
针对已批准应用,采用优化比率结合单个兔单克隆体而制备 MultiMab™ 兔单克隆混合抗体。混合物中的每种抗体都是根据多种测定法中的基序识别和性能严格筛选得来。每种混合物尽可能产生最大修饰覆盖范围,同时确保修饰或基序的高度特异性。
精氨酸甲基化是常见的翻译后修饰,在胞核和细胞浆蛋白中均有发现。精氨酸甲基化蛋白参与许多不同的细胞过程,包括转录调节、信号转导、RNA 代谢和 DNA 损伤修复 (1-3)。精氨酸甲基化由精氨酸 N 甲基转移酶 (PRMT) 的酶家族催化。该酶家族可催化甲基群组从 S-腺苷甲硫氨酸 (AdoMet) 转移到精氨酸胍氮上 (4)。精氨酸甲基化有三种不同形式:非对称二甲基化(aDMA,omega-NG,NG-二甲基精氨酸),其中两个甲基基团在精氨酸胍基氮原子的一端;对称二甲基化(sDMA,omega-NG,NG-二甲基精氨酸),其中每个甲基基团在精氨酸胍基氮原子的一端;单甲基化(MMA,omega-NG-二甲基精氨酸),其中只有一个甲基基团在精氨酸胍基氮原子上。每种修饰都有其潜在的不同功能。尽管所有 PRMT 蛋白都催化 MMA 的形成,但I 型 PRMT (PRMT1, 3, 4, 6) 可新增一个额外的甲基基团,从而产生 aDMA,而 II 型 PRMT (PRMT5 和7)可产生 sDMA。甲基化精氨酸残基经常在富含甘氨酸-精氨酸 (GAR) 蛋白结构域中出现,如 RGG、RG、RXR 重复序列 (5)。但是,PRMT4/CARM1 和 PRMT5 可以甲基化富含脯氨酸-甘氨酸-蛋氨酸 (PGM) 的基序内的精氨酸残基 (6)。
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