Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
60379S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | H |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Rabbit IgG |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
人
使用与人 IFITM1 蛋白的 Pro20 周围残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
干扰素诱导跨膜蛋白 (IFITM) 家族成员包括一个较短的氨基和羧基末端、两个跨膜结构域和一个胞质域 (1)。在人中有四个家族成员:IFITM1、IFITM2、IFITM3 和 IFITM5 (2,3)。小鼠中有两个其他家族成员:IFITM6 和 IFITM7 (2,3)。在某些细胞中可观察到 IFITM 蛋白的基础表达,而且 IFITM 表达还受 1 型和 II 型干扰素诱导 (4-6)。IFITM 家族蛋白的主要功能限于病毒领域,因为 IFITM 蛋白会防止病毒与宿主膜融合,抑制病毒进入胞质 (7,8)。IFITM 蛋白抑制该融合的机制尚不清楚。虽然 IFITM 蛋白存在于质膜和胞内膜,但在限制晚期内体和溶酶体中的病毒融合方面最为有效 (8,9)。此外,不同的家族成员具有限制特定病毒融合的倾向 (9)。例如,IFITM3 在限制甲型流感病毒感染方面最有效,IFITM1 则在控制线状病毒和 SARS 方面最成功 (9,10)。
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