Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
10420S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | H M R Hm Mk |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Rabbit IgG |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
人, 小鼠, 大鼠, 仓鼠 , 猴
使用与人 Iba1/AIF-1 蛋白 Ala139 周围残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
离子钙结合适配器分子 1 (IBA1),也称为同种异体移植炎症因子 1 (AIF-1),是一种进化上保守的细胞浆钙结合蛋白,包含一对 EF-HAND 钙结合基序(1,2)。Iba1/AIF-1最初是从经历慢性移植排斥的人动脉粥样硬化同种异体心脏移植物中的活化巨噬细胞以及大鼠单核细胞(3,4)克隆的。它的功能还不是很清楚,但是 Iba1/AIF-1 的表达由于干扰素-γ 的表达而上调,因此可以调节巨噬细胞依赖性免疫应答(3)。作为 F-肌动蛋白结合蛋白,Iba1/AIF-1 可能起着重塑肌动蛋白细胞骨架的作用,并促进与各种小胶质细胞/巨噬细胞状态相关的形态变化(5)。Iba1/AIF-1 在单核细胞系细胞中也表达独特,因此被广泛用作大脑和其他组织中的小胶质细胞/巨噬细胞的标记物(6)。
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