Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
92319S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | H |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Rabbit IgG |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
人
使用与人 FoxM1 蛋白中 Val699 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
Forkhead box M1 (FoxM1) 是叉头盒家族转录因子,可调节整个细胞周期的多数基因以帮助控制 DNA 复制、有丝分裂和细胞增殖。FoxM1 表达在 G1 和 S 期间提高,并在 G2/M 期达到最高水平(1-3) 。核转位发生在即将进入 G2/M 期时,并且与 FoxM1 磷酸化有关 (4)。通过MAPK (Ser331、Ser704)、Cyclin/Cdk (Ser4、Ser35、Thr600、Thr611、Thr620、Thr627、Ser638)、Plk1 (Ser715、Ser724) 和 Chk2 (Ser376) 实现 FoxM1 的磷酸化,从而稳定和激活 FoxM1 (4-8)。叉头盒 M1 在所有胚胎组织中存在表达,但仅限于成年人的增殖组织 (9)。研究表明,FoxM1 表达受 p53 负调控 (10,11)。FoxM1 上调与许多人类癌症有关,其中包括前列腺癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、结肠癌、胰腺癌、胃癌、膀胱癌、肝癌和肾癌,并且可能与部分肿瘤中的 p53 突变有关 (11,12)。因此,FoxM1 抑制剂已成为癌症潜在治疗的一个感兴趣的话题 (13)。
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