Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
88378S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | H M R |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Mouse IgG2a |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
人, 小鼠, 大鼠
使用与人 CHOP 序列相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
CHOP 是以显性负向方式抑制 C/EB 和 LAP 的 C/EB 同源蛋白 (1)。CHOP 表达由某些细胞应激(包括饥饿)诱导,并且诱导的 CHOP 抑制细胞周期从 G1 期至 S 期的进展(2)。随后证实,在 ER 应激期间,CHOP 表达水平升高并且 CHOP 发挥介导程序性细胞死亡的功能 (3)。研究还发现,CHOP 在 ER 应激期间,介导 GADD34 的激活和 Ero1-Lα 表达。GADD34 转而使 eIF2α Ser51磷酸化位点去磷酸化,从而刺激蛋白质合成。Ero1-Lα 促进内质网 (ER) 内部的氧化性应激 (4)。CHOP 在 ER 应激细胞程序性细胞死亡中的作用与其促进 ER 内部蛋白质合成和氧化性应激的作用相关 (4)。
探索与本品相关的通路。
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