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60712
CD86/B7-2 (GL-1) Rat mAb (PE Conjugate)
偶联抗体
单克隆抗体

CD86/B7-2 (GL-1) Rat mAb (PE Conjugate) #60712

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  1. F
Flow Cytometry Image 1: CD86/B7-2 (GL-1) Rat mAb (PE Conjugate)
使用 CD86/B7-2 (GL-1) 大鼠单克隆抗体 (PE 偶联物)(顶排)或浓度匹配的大鼠同型对照 (PE 偶联物)(底排)和共染料 CD19 (ID3) Rat mAb (APC Conjugate) #39831 对未经(左栏)或经 LPS #14011(500 ng/ml,3 天;右栏)处理的活的小鼠脾细胞进行流式细胞分析。
To Purchase # 60712S
目录# 规格 价格 库存
60712S
100 µg (10 次蛋白印迹实验)

支持数据

反应性 M
敏感性 内源性
MW (kDa)
来源/亚型 大鼠 IgG2a、kappa

应用缩写:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术
  • E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性缩写:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴子
  • Vir- Virus
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-狗
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品说明

Cell Signaling Technology 的这种抗体偶联 PE,并在内部对小鼠细胞进行了直接的流式细胞分析检测。

产品使用信息

为获得最佳的流式细胞术结果,我们建议每次检测使用 0.125 μg 抗体。

应用 稀释度
流式细胞术 1:160

保存

保存在 10 mM NaH2PO4、150 mM NaCl、0.09% NaN3 和 0.1% 明胶中(pH 为 7.2)。保存在 4°C 下时,本产品可保持稳定 12 个月。请不要分装抗体。避光保存。切勿冷冻。

实验步骤

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流式细胞术,针对直接结合抗体的活细胞实验步骤

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。

  1. 1X 磷酸盐缓冲液 (PBS):要制备 1 L 1X PBS:添加 100 ml 10X PBS (#12528) 到 900 ml 水中混合。
  2. 抗体稀释缓冲液:购买即用型流式细胞术抗体稀释缓冲液 (#13616),或在 100 ml 1x PBS 中溶解 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 来制备 0.5 % BSA PBS 缓冲液。储存在 4°C。

注意:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活性染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经流式细胞术验证的细胞染料完整列表

B. 免疫染色

:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。

注意:如果使用全血,则需裂解红血细胞,并在免疫染色之前通过离心分离洗涤。

注意:理想的离心条件根据细胞类型和试剂容量有所不同。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀。

  1. 将所需数量的细胞分装进试管或加样孔中。(通常,每次实验 5 x 105 至 1 x 106 个细胞。)
  2. 进行离心使细胞沉淀,并去除上清液。
  3. 在 100 µl 稀释的一抗中重悬细胞,稀释的一抗按建议的稀释度或根据滴定确定用抗体稀释缓冲液制备。
  4. 在冰上孵育 30 分钟至 1 小时。避光保存。
  5. 用抗体稀释缓冲液进行离心洗涤。丢弃上清液。重复操作。
  6. 在 200-500 μl 抗体稀释缓冲液中重悬细胞后用流式细胞分析仪进行分析。

发布​于 2017 年 6 月 

修订于 2020 年 6 月

实验步骤编号:1504

特异性/敏感性

CD86/B7-2 (GL-1) 大鼠单克隆抗体(PE 偶联物)可检测内源水平的 CD86/B7-2 总蛋白。该抗体可检测细胞外结构域中的表位。

物种反应性:

小鼠

来源/纯化

对组织培养上清液进行亲和层析纯化即可获得该单克隆抗体。该纯化抗体在最佳条件下与从制备过程中分离出来的未反应染料偶联。

背景

CD80 (B7-1, BB1) 和 CD86 (B7-2, B70) 是 B7 细胞表面配体家族的成员,可调节 T 细胞激活和免疫应答。CD80 在激活的抗原呈递细胞中表达,包括树突细胞、B 细胞、单核细胞和巨噬细胞。CD86 在休眠单核细胞、树突细胞、激活的 B 淋巴细胞中表达,在有炎症的情况下进一步上调 (1-3)。CD80 和 CD86 均为 CD28 的配体,CD28 是一种 T 细胞共刺激受体。CD28 与 CD80 或 CD86 的相互作用提供初始 T 细胞激活、T 细胞增殖以及获得效应子功能所需的第二信号 (3-7)。或者,CD80 和 CD86 还是 CTLA-4 的配体,这会导致 T 细胞活性下调 (3,7-9)。
GL-1 抗体被用作 B 细胞、巨噬细胞和树突细胞上 CD86 表达的一种标记物。
  1. Freeman, G.J. et al. (1989) J Immunol 143, 2714-22.
  2. Azuma, M. et al. (1993) Nature 366, 76-9.
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  9. Krummel, M.F. and Allison, J.P. (1995) J Exp Med 182, 459-65.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

限制使用

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