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25978
CD57 (HNK-1) Mouse mAb (Pacific Blue™ Conjugate)
偶联抗体
单克隆抗体

CD57 (HNK-1) Mouse mAb (Pacific Blue Conjugate) #25978

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  1. F
Flow Cytometry Image 1: CD57 (HNK-1) Mouse mAb (Pacific Blue™ Conjugate)
以浓度匹配的 Mouse IgM Isotype Control (Pacific Blue Conjugate)(左图)作为对照,使用 NCAM1 (CD56) (MY31) Mouse mAb (APC Conjugate) #和共染色的 NCAM1 (CD56) (MY31) Mouse mAb (APC Conjugate) #51997(右图)对活性人外周血单核细胞进行流式细胞分析。
To Purchase # 25978S
目录# 规格 价格 库存
25978S
200 µl (100 次测试)

支持数据

反应性 H
敏感性 内源性
MW (kDa)
来源/亚型 小鼠 IgM

应用缩写:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术
  • E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性缩写:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴子
  • Vir- Virus
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-狗
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品说明

Cell Signaling Technology 的这种抗体偶联 Pacific Blue™ 荧光染料,并在内部对人细胞进行了直接的流式细胞分析检测。该抗体显示的物种交叉反应性预计与非偶联抗体 CD57 (HNK-1) Mouse mAb #72031 相同。

产品使用信息

应用 稀释度
流式细胞术 1:50

保存

保存在 PBS(pH 为 7.2)、低于 0.1 % 的叠氮化钠和 2 mg/ml BSA 中。保存在 4°C 下时,本产品可保持稳定 12 个月。不要分装抗体,避光保存,切勿冷冻。

实验步骤

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流式细胞术,针对直接结合抗体的活细胞实验步骤

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。

  1. 1X 磷酸盐缓冲液 (PBS):要制备 1 L 1X PBS:添加 100 ml 10X PBS (#12528) 到 900 ml 水中混合。
  2. 抗体稀释缓冲液:购买即用型流式细胞术抗体稀释缓冲液 (#13616),或在 100 ml 1x PBS 中溶解 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 来制备 0.5 % BSA PBS 缓冲液。储存在 4°C。

注意:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活性染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经流式细胞术验证的细胞染料完整列表

B. 免疫染色

:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。

注意:如果使用全血,则需裂解红血细胞,并在免疫染色之前通过离心分离洗涤。

注意:理想的离心条件根据细胞类型和试剂容量有所不同。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀。

  1. 将所需数量的细胞分装进试管或加样孔中。(通常,每次实验 5 x 105 至 1 x 106 个细胞。)
  2. 进行离心使细胞沉淀,并去除上清液。
  3. 在 100 µl 稀释的一抗中重悬细胞,稀释的一抗按建议的稀释度或根据滴定确定用抗体稀释缓冲液制备。
  4. 在冰上孵育 30 分钟至 1 小时。避光保存。
  5. 用抗体稀释缓冲液进行离心洗涤。丢弃上清液。重复操作。
  6. 在 200-500 μl 抗体稀释缓冲液中重悬细胞后用流式细胞分析仪进行分析。

发布​于 2017 年 6 月 

修订于 2020 年 6 月

实验步骤编号:1504

特异性/敏感性

CD57 (HNK-1) Mouse mAb (Pacific Blue™ Conjugate) 可识别 B3GAT1 蛋白酶产生的 CD57 碳水化合物修饰。

物种反应性:

来源/纯化

使用 HSB-2 细胞的膜抗原对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

CD57 抗原(也称为 HNK-1 和 Leu7),是在细胞表面的各种蛋白质、脂质和硫酸软骨素蛋白聚糖上表达的末端硫酸化聚糖碳水化合物表位(糖表位)(1,2)。CD57 由酶 B3GAT1 合成,存在于外周血淋巴细胞的子集中,包括 NK 细胞和 CD8+ T 细胞以及神经细胞和横纹肌(3-5)。研究表明,CD57 在血小板、单核细胞、粒细胞或红细胞上不表达 (6)。CD57 表位可能在神经细胞粘附中起作用(7),并表征 T 细胞和NK细胞的独特成熟状态(8,9)。CD57 是研究自身免疫性疾病、传染病和癌症患者中功能性免疫缺陷的重要标志物 (1)。
  1. Focosi, D. et al. (2010) J Leukoc Biol 87, 107-16.
  2. Górska, A. et al. (2016) Arch Immunol Ther Exp (Warsz) 64, 497-503.
  3. Kared, H. et al. (2016) Cancer Immunol Immunother 65, 441-52.
  4. Lopez-Vergès, S. et al. (2010) Blood 116, 3865-74.
  5. Mechtersheimer, G. et al. (1991) Cancer Res 51, 1300-7.
  6. Stelin, S. et al. (2009) J Indian Soc Periodontol 13, 150-4.
  7. Künemund, V. et al. (1988) J Cell Biol 106, 213-23.
  8. Sze, D.M. et al. (2001) Blood 98, 2817-27.
  9. Nielsen, C.M. et al. (2013) Front Immunol 4, 422.

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仅供研究使用。不得用于诊断流程。
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