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82032
CD45RO (UCHL1) Mouse mAb (APC Conjugate)
抗体偶联物
单克隆抗体

CD45RO (UCHL1) Mouse mAb (APC Conjugate) #82032

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筛选器:
  1. F
Flow Cytometry Image 1: CD45RO (UCHL1) Mouse mAb (APC Conjugate)
以浓度匹配的 Mouse Isotype Control (APC Conjugate)(虚线)作为对照,使用 CD45RO (UCHL1) Mouse mAb (APC Conjugate)(实线)对活的人外周血单核细胞进行流式细胞分析。
To Purchase # 82032S
目录# 规格 价格 库存
82032S
100 µl (50 次检测)

支持性数据

反应性 H
灵敏度 内源性
MW (kDa)
来源/同种型 小鼠 IgG2a

应用关键词:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • GP-豚鼠
  • Rab-Rabbit
  • All-预期所有物种

产品说明

Cell Signaling Technology 的这种抗体在最佳条件下偶联 APC,并在内部对人细胞进行了直接的流式细胞分析检测。该抗体显示的物种交叉反应性预计与非偶联的 CD45RO (UCHL1) Mouse mAb (IHC Specific) #55618 相同。

产品使用信息

应用 稀释度
流式细胞术(活性) 1:50

保存

保存在 PBS(pH 为 7.2)、低于 0.1 % 的叠氮化钠和 2 mg/ml BSA 中。4°C 保存。切勿分装抗体。避光保存。切勿冷冻。

实验步骤

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流式细胞术,针对直接结合抗体的活细胞实验步骤

A. 溶液与试剂

:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。

  1. 1 X 磷酸盐缓冲生理盐水 (PBS):要配制 1 L 1X PBS:将 100 ml 10X PBS (#12528) 添加到 900 ml 水,混合。
  2. 抗体稀释缓冲液:购买即用型流式细胞术抗体稀释缓冲液 (#13616),或在 100 ml 1x PBS 中溶解 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 来配制 0.5 % BSA PBS 缓冲液。4°C 保存。

:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活力指示染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品网页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经验证用于流式细胞术的细胞染料完整列表。

B. 免疫染色

:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。

:如果使用全血,则需裂解红血细胞,并在免疫染色之前通过离心分离洗涤。

:人 Fc 受体与兔 IgG 发生交叉反应。当感兴趣的细胞表达高水平的 Fc 受体蛋白(例如,巨噬细胞/单核细胞谱系)时,在用兔抗体进行免疫染色之前,用人 Fc 块预孵育活细胞。

:最佳离心条件会根据细胞类型和试剂容量变动。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀下来。

  1. 将所需数目的细胞分装入试管或小孔中。(通常,每次测定 5 x 105 至 1 x 106 个细胞。)
  2. 通过离心使细胞沉淀下来,移除上清液。
  3. 在 100 µl 稀释的一抗中重悬细胞,这种一抗按建议的稀释度或如通过滴定所确定那样以抗体稀释缓冲液配制。
  4. 在冰上孵育 30 分钟至 1 小时。避光。
  5. 用抗体稀释缓冲液进行离心洗涤。弃去上清液。重复。
  6. 在 200-500 μl 抗体稀释缓冲液中重悬细胞后用流式细胞分析仪进行分析。

发布​时间 2017 年 6 月

修订时间 2022 年 1 月

实验步骤编号:1504

特异性/灵敏度

CD45RO (UCHL1) Mouse mAb (APC Conjugate) 可检测 CD45RO 总蛋白的内源水平。

物种反应性:

来源/纯化

通过采用 IL-2 依赖性 T 细胞系 CA1,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

蛋白质磷酸酶 (PTP) 受体 CD45 是 I 型跨膜蛋白,包括选择性剪切产生的一对胞内酪氨酸磷酸酶结构域和可变胞外结构域 (1)。CD45 的催化活性随第一磷酸酶结构域 (D1) 变化而变化,而第二磷酸酶结构域 (D2) 可以与第一结构域相互作用并使其稳定,或募集/结合底物 (2,3)。CD45 与抗原受体复合体蛋白直接相互作用,或激活涉及调节 T 细胞和 B 细胞抗原受体信号转导的 Src 家族激酶 (1)。具体而言,CD45 使 Src-家族激酶 Lck 和 Fyn 在其保守的阴性调节羧基末端酪氨酸残基处去磷酸化,并上调激酶活性。相反,研究显示,CD45 还可以通过在正向调节性自磷酸化位点去磷酸化,抑制 Lck 和 Fyn。CD45 似乎是传导信号的正向调节分子和负向调节分子,视具体刺激和细胞类型进行信号转导 (1)。淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞、嗜碱性粒细胞、嗜中性粒细胞等人体白细胞表达 CD45,而红细胞和血小板为 CD45 表达阴性 (4)。

通路

探索与本品相关的通路。

有限使用

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