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79253
CD34 (ICO115) Mouse mAb (PE Conjugate)
抗体偶联物
单克隆抗体

CD34 (ICO115) Mouse mAb (PE Conjugate) #79253

引用 (2)
筛选器:
  1. F
Flow Cytometry Image 1: CD34 (ICO115) Mouse mAb (PE Conjugate)
使用 CD34 (ICO-115) Mouse mAb (PE Conjugate) 对加标 CD34+ Stem-Trol Control Cells (Beckman Coulter) 的外周血细胞进行流式细胞分析。
To Purchase # 79253S
目录# 规格 价格 库存
79253S
100 µl (50 次检测)

支持性数据

反应性 H
灵敏度 内源性
MW (kDa)
来源/同种型 小鼠 IgG1

应用关键词:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品说明

Cell Signaling Technology 的这种抗体接合藻红蛋白 (PE),并可对人体细胞进行了直接的流式细胞术分析内部检测。该抗体的物种交叉反应性预计与非偶联 CD34 (ICO115) Mouse mAb #3569 相同。

产品使用信息

应用 稀释度
流式细胞术 1:50

保存

保存在 PBS(pH 为 7.2)、低于 0.1 % 的叠氮化钠和 2 mg/ml BSA 中。4°C 保存。切勿分装抗体。避光。切勿冷冻。

实验步骤

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流式细胞术,针对直接结合抗体的活细胞实验步骤

A. 溶液与试剂

:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。

  1. 1 X 磷酸盐缓冲生理盐水 (PBS):要配制 1 L 1X PBS:将 100 ml 10X PBS (#12528) 添加到 900 ml 水,混合。
  2. 抗体稀释缓冲液:购买即用型流式细胞术抗体稀释缓冲液 (#13616),或在 100 ml 1x PBS 中溶解 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 来配制 0.5 % BSA PBS 缓冲液。4°C 保存。

:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活力指示染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品网页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经验证用于流式细胞术的细胞染料完整列表。

B. 免疫染色

:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。

:如果使用全血,则需裂解红血细胞,并在免疫染色之前通过离心分离洗涤。

:人 Fc 受体与兔 IgG 发生交叉反应。当感兴趣的细胞表达高水平的 Fc 受体蛋白(例如,巨噬细胞/单核细胞谱系)时,在用兔抗体进行免疫染色之前,用人 Fc 块预孵育活细胞。

:最佳离心条件会根据细胞类型和试剂容量变动。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀下来。

  1. 将所需数目的细胞分装入试管或小孔中。(通常,每次测定 5 x 105 至 1 x 106 个细胞。)
  2. 通过离心使细胞沉淀下来,移除上清液。
  3. 在 100 µl 稀释的一抗中重悬细胞,这种一抗按建议的稀释度或如通过滴定所确定那样以抗体稀释缓冲液配制。
  4. 在冰上孵育 30 分钟至 1 小时。避光。
  5. 用抗体稀释缓冲液进行离心洗涤。弃去上清液。重复。
  6. 在 200-500 μl 抗体稀释缓冲液中重悬细胞后用流式细胞分析仪进行分析。

发布​时间 2017 年 6 月

修订时间 2022 年 1 月

实验步骤编号:1504

特异性/灵敏度

CD34 (ICO115) Mouse mAb (PE Conjugate) 可检测内源水平的 CD34 总蛋白。

物种反应性:

来源/纯化

通过使用慢性髓细胞性白血病患者的原始细胞对 BALB/c 小鼠进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

CD34 是由造血干细胞/祖细胞、血管内皮和一些成纤维细胞表达的 I 型跨膜糖化磷酸蛋白 (1)。CD34 表达多年来用作鉴定造血干细胞的标志。CD34+ 造血干细胞在细胞因子或生长因子刺激时,扩增并分化成各种淋巴造血谱系,并在分化时丧失 CD34 表达。但是,在不同实验室中进行的最近研究与该常规矛盾 (2)。CD34 的胞外结构域与 CD43 (一种涉及细胞间黏附的蛋白质)同源,并且已经证实 CD34 作为细胞黏附的负调节分子发挥作用 (3)。CD34 与 CrkL 结合,但不与 CrkII 结合,CrkII 是 PKC 的底物,并且 PKC 的激活与 CD34 的表面表达偶联 (1,4)。
  1. Felschow, D. M. et al. (2001) Blood 97, 3768-3775.
  2. Sato, T. et al. (1999) Blood 94, 2548-2554.
  3. Drew, E. et al. (2005) Immunity 22, 43-57.
  4. Fackler, M. J. et al. (1992) J. Biol. Chem. 267, 17540-17546.

通路与蛋白质

探索与本产品相关的通路 + 蛋白质。

限制使用

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仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
Stem-Trol 是 Beckman Coulter, Inc 的商标。
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