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68390
CD24 (M1/69) Rat mAb (APC Conjugate)
抗体偶联物
单克隆抗体

CD24 (M1/69) Rat mAb (APC Conjugate) #68390

引用 (1)
筛选器:
  1. F
Flow Cytometry Image 1: CD24 (M1/69) Rat mAb (APC Conjugate)
以浓度匹配的大鼠 (LTF-2) 单克隆抗体 IgG2b 同型对照 (APC 偶联物) #34828(虚线)作为对照,使用 CD24 (M1/69) 大鼠克隆抗体 (APC 偶联物)(实线)对活的小鼠脾细胞进行流式细胞分析。
To Purchase # 68390S
目录# 规格 价格 库存
68390S
100 µg

支持性数据

反应性 M
灵敏度 内源性
MW (kDa)
来源/同种型 大鼠 IgG2b、kappa

应用关键词:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品说明

Cell Signaling Technology 的这种抗体偶联 APC,并在内部对小鼠细胞进行了直接的流式细胞分析检测。

产品使用信息

为获得最佳的流式细胞术结果,我们建议每次检测使用 0.06 μg 抗体。

应用 稀释度
流式细胞术 1:330

保存

保存在 10 mM NaH2PO4、150 mM NaCl、0.09% NaN3 和 0.1% 明胶中(pH 为 7.2)。保存在 4°C 下时,本产品可保持稳定 12 个月。切勿分装抗体。避光。切勿冷冻。

实验步骤

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流式细胞术,针对直接结合抗体的活细胞实验步骤

A. 溶液与试剂

:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。

  1. 1 X 磷酸盐缓冲生理盐水 (PBS):要配制 1 L 1X PBS:将 100 ml 10X PBS (#12528) 添加到 900 ml 水,混合。
  2. 抗体稀释缓冲液:购买即用型流式细胞术抗体稀释缓冲液 (#13616),或在 100 ml 1x PBS 中溶解 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 来配制 0.5 % BSA PBS 缓冲液。4°C 保存。

:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活力指示染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品网页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经验证用于流式细胞术的细胞染料完整列表。

B. 免疫染色

:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。

:如果使用全血,则需裂解红血细胞,并在免疫染色之前通过离心分离洗涤。

:人 Fc 受体与兔 IgG 发生交叉反应。当感兴趣的细胞表达高水平的 Fc 受体蛋白(例如,巨噬细胞/单核细胞谱系)时,在用兔抗体进行免疫染色之前,用人 Fc 块预孵育活细胞。

:最佳离心条件会根据细胞类型和试剂容量变动。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀下来。

  1. 将所需数目的细胞分装入试管或小孔中。(通常,每次测定 5 x 105 至 1 x 106 个细胞。)
  2. 通过离心使细胞沉淀下来,移除上清液。
  3. 在 100 µl 稀释的一抗中重悬细胞,这种一抗按建议的稀释度或如通过滴定所确定那样以抗体稀释缓冲液配制。
  4. 在冰上孵育 30 分钟至 1 小时。避光。
  5. 用抗体稀释缓冲液进行离心洗涤。弃去上清液。重复。
  6. 在 200-500 μl 抗体稀释缓冲液中重悬细胞后用流式细胞分析仪进行分析。

发布​时间 2017 年 6 月

修订时间 2022 年 1 月

实验步骤编号:1504

特异性/灵敏度

CD24 (M1/69) 大鼠克隆抗体 (APC 偶联物) 可检测 CD24 总蛋白的内源水平。该抗体可检测细胞外结构域中的表位。

物种反应性:

小鼠

来源/纯化

通过亲和色谱从组织培养上清液纯化这种单克隆抗体。该纯化抗体在最佳条件下与从制备过程中分离出来的未反应染料偶联。

背景

CD24(也称耐热性抗原 HSA)是一种与黏附有关的 P 选择素配体。它是一种在造血细胞、神经细胞和上皮细胞等许多类型的细胞中表达的 GPI 锚定糖蛋白。CD24 被广泛用来确定淋巴细胞发育的阶段 (1-3)。它还在人细胞中结合 Siglec-10,或在小鼠细胞中结合 Siglec-G (4,5)。CD24 常被用作检测和分离各种癌细胞类型中的癌症干细胞标记物 (6,7)。
  1. Sammar, M. et al. (1994) Int Immunol 6, 1027-36.
  2. Aigner, S. et al. (1997) Blood 89, 3385-95.
  3. Fang, X. et al. (2010) Cell Mol Immunol 7, 100-3.
  4. Chen, G.Y. et al. (2009) Science 323, 1722-5.
  5. Toubai, T. et al. (2014) Blood 123, 3512-23.
  6. Jaggupilli, A. and Elkord, E. (2012) Clin Dev Immunol 2012, 708036.
  7. Yu, Z. et al. (2012) Int J Biochem Cell Biol 44, 2144-51.

通路与蛋白质

探索与本产品相关的通路 + 蛋白质。

限制使用

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