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69077
CD20 (2H7) Mouse mAb (APC Conjugate)
偶联抗体
单克隆抗体

CD20 (2H7) Mouse mAb (APC Conjugate) #69077

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筛选器:
  1. F
Flow Cytometry Image 1: CD20 (2H7) Mouse mAb (APC Conjugate)

以浓度匹配的小鼠同型对照(APC 偶联物)(虚线)作为对照,使用 CD20 (2H7) 小鼠单抗(APC 偶联物)(实线)对活的人外周血单核细胞进行流式细胞分析。

购买 # 69077S
产品货号 规格 价格 库存
69077S
500 µl (100 次测试)

支持数据

反应性 H
敏感性 内源性
MW (kDa)
来源/亚型 小鼠 IgG2b、kappa

应用缩写:

  • W-Western
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术
  • E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性缩写:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴子
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-狗
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品说明

Cell Signaling Technology 的这种抗体偶联 APC,并在内部对人细胞进行了直接流式细胞分析检测。

产品使用信息

应用 稀释度
流式细胞术 1:20

保存

保存在 10 mM NaH2PO4、150 mM NaCl、0.09% NaN3 和 0.1% 明胶(pH 为 7.2)中。请不要分装抗体。避光保存。切勿冷冻。

实验步骤

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流式细胞术,针对直接结合抗体的活细胞实验步骤

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。

  1. 1X 磷酸盐缓冲液 (PBS):要制备 1 L 1X PBS:添加 100 ml 10X PBS (#12528) 到 900 ml 水中混合。
  2. 抗体稀释缓冲液:购买即用型流式细胞术抗体稀释缓冲液 (#13616),或在 100 ml 1x PBS 中溶解 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 来制备 0.5 % BSA PBS 缓冲液。储存在 4°C。

注意:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活性染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经流式细胞术验证的细胞染料完整列表

B. 免疫染色

:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。

注意:如果使用全血,则需裂解红血细胞,并在免疫染色之前通过离心分离洗涤。

注意:理想的离心条件根据细胞类型和试剂容量有所不同。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀。

  1. 将所需数量的细胞分装进试管或加样孔中。(通常,每次实验 5 x 105 至 1 x 106 个细胞。)
  2. 进行离心使细胞沉淀,并去除上清液。
  3. 在 100 µl 稀释的一抗中重悬细胞,稀释的一抗按建议的稀释度或根据滴定确定用抗体稀释缓冲液制备。
  4. 在冰上孵育 30 分钟至 1 小时。避光保存。
  5. 用抗体稀释缓冲液进行离心洗涤。丢弃上清液。重复操作。
  6. 在 200-500 μl 抗体稀释缓冲液中重悬细胞后用流式细胞分析仪进行分析。

发布​于 2017 年 6 月 

修订于 2020 年 6 月

实验步骤编号:1504

特异性/敏感性

CD20 (2H7) 小鼠单抗(APC 偶联物)可检测 CD20 总蛋白的内源水平。该抗体可检测细胞外结构域中的表位。

物种反应性:

来源/纯化

对组织培养上清液进行亲和层析纯化即可获得该单克隆抗体。该纯化抗体在最佳条件下与从制备过程中分离出来的未反应染料偶联。

背景

B 淋巴细胞抗原 CD20(也称为 MS4A1;跨膜结构域 4 亚家族 A 成员 1)是参与调节 B 细胞激活和增殖的细胞表面磷酸化蛋白 (1,2)。它通常用作识别 B 细胞的标志物,在整个 B 细胞发育过程中表达,直到它们分化成为浆细胞。CD20 没有已知配体,其表达和功能在人和小鼠之间很大程度上保守 (1-3)。有证据表明,CD20 对于钙池调控钙离子通道 (Soc) 进入是必要的,这将导致 B 细胞激活所需的细胞质钙水平升高 (4-5)。抗 CD20 抗体免疫疗法通过激活天然单核细胞网来消耗 B 细胞,是 B 细胞淋巴瘤、白血病和自身免疫性疾病和常用疗法 (6)。

该 2H7 抗体广泛用来检测正常和恶性 B 细胞 (7)。

  1. Stashenko, P. et al. (1980) J Immunol 125, 1678-85.
  2. Tedder, T.F. et al. (1985) J Immunol 135, 973-9.
  3. Tedder, T.F. et al. (1988) J Immunol 141, 4388-94.
  4. Bubien, J.K. et al. (1993) J Cell Biol 121, 1121-32.
  5. Li, H. et al. (2003) J Biol Chem 278, 42427-34.
  6. Uchida, J. et al. (2004) J Exp Med 199, 1659-69.
  7. Liu, A.Y. et al. (1987) J Immunol 139, 3521-6.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

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