反应性 | H M |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | |
来源/亚型 | 兔 IgG |
产品信息
Cell Signaling Technology 的这种抗体偶联 Alexa Fluor® 647 荧光染料,并在内部对人和小鼠细胞进行了直接的流式细胞分析检测。该抗体显示的物种交叉反应性预计与非偶联 CD19 (D4V4B) XP® Rabbit mAb #90176 相同。
应用 | 稀释度 |
---|---|
流式细胞术 | 1:50 |
保存在 PBS(pH 为 7.2)、低于 0.1 % 的叠氮化钠和 2 mg/ml BSA 中。储存在 4°C。不要分装抗体,避光保存,切勿冷冻。
本实验步骤中所需的所有试剂可与我们的 Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593 一起高效购买,或使用下文所列的货号单独购买。
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
注意:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活性染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经流式细胞术验证的细胞染料完整列表。
注:固定前,应分离黏附细胞或组织,并放在单细胞悬浮液中。
注意:理想的离心条件根据细胞类型和试剂容量有所不同。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀。
注意:如果使用全血,则需在固定前裂解红细胞并通过离心洗涤。
注意:如果表位被甲醛和/或甲醇破坏,可以在固定前添加靶向 CD 标记物或其他胞外蛋白的抗体。在固定和透化过程中,这类抗体保持结合目的靶标。但注意,某些荧光团(包括 PE 和 APC)会被甲醇损坏,因此不应在透化前添加。如果您不确定,请进行小规模实验。
注:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
发布于 2009 年 7 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:407
CD19 (Intracellular Domain) (D4V4B) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate) 可检测 CD19 总蛋白的内源水平。
人, 小鼠
牛
使用与人 CD19 蛋白中 Leu427 周围残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
CD19 是一种 95 kDa 的共受体,它能在 B 细胞中放大信号转导级联反应 (1)。在 B 细胞表面,CD19 结合 CD21、CD81 和 Leu-13 并发挥作用。CD19 的胞质尾区有 9 个保守的酪氨酸残基,这些残基通过将信号转导分子偶联到其受体上在 CD19 介导的功能中发挥重要作用 (1)。B 细胞受体或 CD19 连结后,CD19 的 Tyr531 和 Tyr500 位点被逐渐磷酸化。此磷酸化会使 PI3 激酶和 Src 家族的酪氨酸激酶偶联到 CD19 并激活 PI3K 和 Src 信号转导通路 (2,3)。B 细胞受体与 CD19 的共结合也促进了 CD19 中 Tyr409 位点的磷酸化。在这些位点的磷酸化也使得它能够结合 Vav 并介导增强的胞内钙反应和 JNK 信号通路 (4,5)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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