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54508
CD19 (1D3) Rat mAb (violetFluor™ 450 Conjugate)
抗体偶联物
单克隆抗体

CD19 (1D3) Rat mAb (violetFluor 450 Conjugate) #54508

引用 (1)
筛选器:
  1. F
Flow Cytometry Image 1: CD19 (1D3) Rat mAb (violetFluor™ 450 Conjugate)
使用 CD19 (1D3) Rat mAb (violetFluor 450 Conjugate)(实线)对小鼠脾活细胞进行流式细胞分析,

以浓度匹配的 Rat Isotype Control (violetFluor 450 Conjugate)(虚线)作为对照。

To Purchase # 54508S
目录# 规格 价格 库存
54508S
100 µg

支持性数据

反应性 M
灵敏度 内源性
MW (kDa)
来源/同种型 大鼠 IgG2a、kappa

应用关键词:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • GP-豚鼠
  • Rab-Rabbit
  • All-预期所有物种

产品说明

Cell Signaling Technology 的这种抗体偶联 violetFluor™ 450,并在内部对小鼠细胞进行了直接的流式细胞分析检测。

产品使用信息

为获得最佳的流式细胞术结果,我们建议每次检测使用 0.5 μg 抗体。

应用 稀释度
流式细胞术(固定/通透) 1:40
流式细胞术(活性) 1:40

保存

保存在 10 mM NaH2PO4、150 mM NaCl、0.09% NaN3 和 0.1% 明胶中(pH 为 7.2)。保存在 4°C 下时,本产品可保持稳定 12 个月。切勿分装抗体。避光。切勿冷冻。

实验步骤

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使用 FoxP3/转录因子固定/通透试剂盒进行流式细胞术分析

该抗体在使用 FoxP3/Transcription Factor Fixation/Permeabilization Kit #43481 的流式细胞术中进行了验证。如需了解详细说明,请参阅该试剂盒随附的实验方案。

实验步骤编号:1804

流式细胞术,针对直接结合抗体的活细胞实验步骤

A. 溶液与试剂

:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。

  1. 1 X 磷酸盐缓冲生理盐水 (PBS):要配制 1 L 1X PBS:将 100 ml 10X PBS (#12528) 添加到 900 ml 水,混合。
  2. 抗体稀释缓冲液:购买即用型流式细胞术抗体稀释缓冲液 (#13616),或在 100 ml 1x PBS 中溶解 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 来配制 0.5 % BSA PBS 缓冲液。4°C 保存。

:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活力指示染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品网页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经验证用于流式细胞术的细胞染料完整列表。

B. 免疫染色

:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。

:如果使用全血,则需裂解红血细胞,并在免疫染色之前通过离心分离洗涤。

:人 Fc 受体与兔 IgG 发生交叉反应。当感兴趣的细胞表达高水平的 Fc 受体蛋白(例如,巨噬细胞/单核细胞谱系)时,在用兔抗体进行免疫染色之前,用人 Fc 块预孵育活细胞。

:最佳离心条件会根据细胞类型和试剂容量变动。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀下来。

  1. 将所需数目的细胞分装入试管或小孔中。(通常,每次测定 5 x 105 至 1 x 106 个细胞。)
  2. 通过离心使细胞沉淀下来,移除上清液。
  3. 在 100 µl 稀释的一抗中重悬细胞,这种一抗按建议的稀释度或如通过滴定所确定那样以抗体稀释缓冲液配制。
  4. 在冰上孵育 30 分钟至 1 小时。避光。
  5. 用抗体稀释缓冲液进行离心洗涤。弃去上清液。重复。
  6. 在 200-500 μl 抗体稀释缓冲液中重悬细胞后用流式细胞分析仪进行分析。

发布​时间 2017 年 6 月

修订时间 2022 年 1 月

实验步骤编号:1504

特异性/灵敏度

CD19 (1D3) 大鼠单克隆抗体(violetFluor™ 450 偶联物)可检测小鼠内源水平的 CD19 总蛋白。该抗体可检测细胞外结构域中的表位。

物种反应性:

小鼠

来源/纯化

通过亲和色谱从组织培养上清液纯化这种单克隆抗体。该纯化抗体在最佳条件下与从制备过程中分离出来的未反应染料偶联。

背景

CD19 是一种 95 kDa 的共受体,它能在 B 细胞中放大信号转导级联反应 (1)。在 B 细胞表面,CD19 结合 CD21、CD81 和 Leu-13 并发挥作用。CD19 的胞质尾区有 9 个保守的酪氨酸残基,这些残基通过将信号转导分子偶联到其受体上在 CD19 介导的功能中发挥重要作用 (1)。B 细胞受体或 CD19 连结后,CD19 的 Tyr531 和 Tyr500 位点被逐渐磷酸化。此磷酸化会使 PI3 激酶和 Src 家族的酪氨酸激酶偶联到 CD19 并激活 PI3K 和 Src 信号转导通路 (2,3)。B 细胞受体与 CD19 的共结合也促进了 CD19 中 Tyr409 位点的磷酸化。在这些位点的磷酸化也使得它能够结合 Vav 并介导增强的胞内钙反应和 JNK 信号通路 (4,5)。
1D3 克隆被广泛用作小鼠 B 细胞和树突细胞亚群表面上 CD19 表达的一种表型标记物。

限制使用

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