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27221
CD19 (1D3) Rat mAb (PE-Cy7® Conjugate)
偶联抗体
单克隆抗体

CD19 (1D3) Rat mAb (PE-Cy7® Conjugate) #27221

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筛选器:
  1. F
Flow Cytometry Image 1: CD19 (1D3) Rat mAb (PE-Cy7® Conjugate)

以浓度匹配的大鼠同型对照 (PE-Cy7® 偶联物)(虚线)作为对照,使用 CD19 (1D3) 大鼠单克隆抗体 (PE-Cy7® 偶联物)(实线)对活的小鼠脾细胞进行流式细胞分析。

购买 # 27221S
产品货号 规格 价格 库存
27221S
100 µg

支持数据

反应性 M
敏感性 内源性
MW (kDa)
来源/亚型 大鼠 IgG2a、kappa

应用缩写:

  • W-Western
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术
  • E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性缩写:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴子
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-狗
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品说明

Cell Signaling Technology 的这种抗体偶联 PE-Cy7®,并在内部对小鼠细胞进行了直接的流式细胞分析检测。

产品使用信息

为获得最佳的流式细胞术结果,我们建议每次检测使用 0.25 μg 抗体。

应用 稀释度
流式细胞术 1:80

保存

保存在 10 mM NaH2PO4、150 mM NaCl、0.09% NaN3 和 0.1% 明胶(pH 为 7.2)中。保存在 4°C 下时,本产品可保持稳定 6 个月。请不要分装抗体。避光保存。切勿冷冻。

实验步骤

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流式细胞术,针对直接结合抗体的活细胞实验步骤

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。

  1. 1X 磷酸盐缓冲液 (PBS):要制备 1 L 1X PBS:添加 100 ml 10X PBS (#12528) 到 900 ml 水中混合。
  2. 抗体稀释缓冲液:购买即用型流式细胞术抗体稀释缓冲液 (#13616),或在 100 ml 1x PBS 中溶解 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 来制备 0.5 % BSA PBS 缓冲液。储存在 4°C。

注意:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活性染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经流式细胞术验证的细胞染料完整列表

B. 免疫染色

:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。

注意:如果使用全血,则需裂解红血细胞,并在免疫染色之前通过离心分离洗涤。

注意:理想的离心条件根据细胞类型和试剂容量有所不同。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀。

  1. 将所需数量的细胞分装进试管或加样孔中。(通常,每次实验 5 x 105 至 1 x 106 个细胞。)
  2. 进行离心使细胞沉淀,并去除上清液。
  3. 在 100 µl 稀释的一抗中重悬细胞,稀释的一抗按建议的稀释度或根据滴定确定用抗体稀释缓冲液制备。
  4. 在冰上孵育 30 分钟至 1 小时。避光保存。
  5. 用抗体稀释缓冲液进行离心洗涤。丢弃上清液。重复操作。
  6. 在 200-500 μl 抗体稀释缓冲液中重悬细胞后用流式细胞分析仪进行分析。

发布​于 2017 年 6 月 

修订于 2020 年 6 月

实验步骤编号:1504

特异性/敏感性

CD19 (1D3) 大鼠单克隆抗体(PE-Cy7® 偶联物)可检测小鼠内源水平的 CD19 总蛋白。该抗体可检测细胞外结构域中的表位。

物种反应性:

小鼠

来源/纯化

对组织培养上清液进行亲和层析纯化即可获得该单克隆抗体。该纯化抗体在最佳条件下与从制备过程中分离出来的未反应染料偶联。

背景

CD19 是一种 95 kDa 的共受体,它能在 B 细胞中放大信号转导级联反应 (1)。在 B 细胞的表面,CD19 与 CD21、CD81 和 Leu-13 结合并发挥其作用。CD19 的胞质尾区有 9 个保守的酪氨酸残基,这些残基通过将信号转导分子偶联到其受体上在 CD19 介导的功能中发挥重要作用 (1)。B 细胞受体或 CD19 连结后,CD19 的 Tyr531 和 Tyr500 位点被逐渐磷酸化。此磷酸化会使 PI3 激酶和 Src 家族的酪氨酸激酶偶联到 CD19 并激活 PI3K 和 Src 信号转导通路 (2,3)。B 细胞受体与 CD19 的共结合也促进了 CD19 中 Tyr409 位点的磷酸化。在这些位点的磷酸化也使得它能够结合 Vav 并介导增强的胞内钙反应和 JNK 信号通路 (4,5)。

1D3 克隆被广泛用作小鼠 B 细胞和树突细胞亚群表面上 CD19 表达的一种表型标记物。

  1. Tedder, T.F. et al. (1997) Immunity 6, 107-18.
  2. Buhl, A.M. and Cambier, J.C. (1999) J Immunol 162, 4438-46.
  3. Fujimoto, M. et al. (2000) Immunity 13, 47-57.
  4. O'Rourke, L.M. et al. (1998) Immunity 8, 635-45.
  5. Sato, S. et al. (1997) Proc Natl Acad Sci U S A 94, 13158-62.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

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