我们有一个新的 URL!www.cellsignal.cn | 点击了解更多 >>
23290
CD16 (3G8) Mouse mAb (PE-Cy7® Conjugate)
偶联抗体
单克隆抗体

CD16 (3G8) Mouse mAb (PE-Cy7® Conjugate) #23290

引用 (0)
筛选器:
  1. F
Flow Cytometry Image 1: CD16 (3G8) Mouse mAb (PE-Cy7® Conjugate)

以浓度匹配的 Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (PE-Cy7® Conjugate) #79339(左图)作为对照,使用 CD16 (3G8) Mouse mAb (PE-Cy7® Conjugate) 和共染料 NCAM1 (CD56) (MY31) Mouse mAb (APC Conjugate) #51997(右图)对活的人外周血单核细胞进行流式细胞分析。

购买 # 23290S
产品货号 规格 价格 库存
23290S
500 µl (100 次测试)

我们的中国办事处关闭

我们的中国办事处因国庆节而关闭。我们将在星期五(10 月 9 日 )重新开放。

感谢您的耐心等待。

支持数据

反应性 H
敏感性 内源性
MW (kDa)
来源/亚型 小鼠 IgG1、kappa

应用缩写:

  • W-Western
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术
  • E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性缩写:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴子
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-狗
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品说明

Cell Signaling Technology 的这种抗体偶联 PE-Cy7®,并在内部对人细胞进行了直接流式细胞分析检测。

产品使用信息

应用 稀释度
流式细胞术 1:20

保存

保存在 10 mM NaH2PO4、150 mM NaCl、0.09% NaN3 和 0.1% 明胶(pH 为 7.2)中。保存在 4°C 下时,本产品可保持稳定 6 个月。不要分装抗体,避光保存,切勿冷冻。

实验步骤

打印

查看 > 折叠 >

流式细胞术,针对直接结合抗体的活细胞实验步骤

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。

  1. 1X 磷酸盐缓冲液 (PBS):要制备 1 L 1X PBS:添加 100 ml 10X PBS (#12528) 到 900 ml 水中混合。
  2. 抗体稀释缓冲液:购买即用型流式细胞术抗体稀释缓冲液 (#13616),或在 100 ml 1x PBS 中溶解 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 来制备 0.5 % BSA PBS 缓冲液。储存在 4°C。

注意:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活性染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经流式细胞术验证的细胞染料完整列表

B. 免疫染色

:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。

注意:如果使用全血,则需裂解红血细胞,并在免疫染色之前通过离心分离洗涤。

注意:理想的离心条件根据细胞类型和试剂容量有所不同。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀。

  1. 将所需数量的细胞分装进试管或加样孔中。(通常,每次实验 5 x 105 至 1 x 106 个细胞。)
  2. 进行离心使细胞沉淀,并去除上清液。
  3. 在 100 µl 稀释的一抗中重悬细胞,稀释的一抗按建议的稀释度或根据滴定确定用抗体稀释缓冲液制备。
  4. 在冰上孵育 30 分钟至 1 小时。避光保存。
  5. 用抗体稀释缓冲液进行离心洗涤。丢弃上清液。重复操作。
  6. 在 200-500 μl 抗体稀释缓冲液中重悬细胞后用流式细胞分析仪进行分析。

发布​于 2017 年 6 月 

修订于 2020 年 6 月

实验步骤编号:1504

特异性/敏感性

CD16 (3G8) Mouse mAb (PE-Cy7® Conjugate) 可检测 CD16 总蛋白的内源水平。该抗体可检测细胞外结构域中的表位。

物种反应性:

来源/纯化

对组织培养上清液进行亲和层析纯化即可获得该单克隆抗体。该纯化抗体在最佳条件下与从制备过程中分离出来的未反应染料偶联。

背景

CD64 (FcgammaRI)、CD32 (FcgammaRII) 和 CD16 (FcgammaRIII) 是免疫球蛋白超家族的三大类。CD64 对含有三个 Ig 样结构域的 IgG 具有较高的亲和性,而 CD32 和 CD16 与具有两个 Ig 样结构域的 IgG 具有较低的亲和性。两种基因编码 CD16-A 和 CD16-B,导致它们仅在胞外域中存在 6 氨基酸差异。但 CD16-A 具有一个跨膜锚点,而 CD16-B 则具有一个糖基磷脂酰肌醇 (1)。CD64、CD32 和 CD16 是膜糖蛋白,在所有免疫活性细胞中表达,并且可引发不同的免疫功能(激活 B 细胞、吞噬作用、抗体依赖性细胞毒性、免疫复合体清除以及抗原呈递增强)(2)。CD16 交联会诱导 NK 细胞中 Lck 的酪氨酸磷酸化 (Tyr394) (3)。与 CD16 相对比的 CD32 在胞质域中具有酪氨酸激活基序,可结合加工这些基序的分子 (1)。

CD16A 在自然杀伤细胞、巨噬细胞以及部分单核细胞中表达,而 CD16B 则在嗜中性粒细胞中表达 (4)。通常结合 CD16 和 CD56 来检测自然杀伤细胞,其中使用 CD16 可检测具有细胞毒性的自然杀伤细胞 (5)。

3G8 抗体可广泛用作上述细胞类型中 CD16 表达的标志物 (6)。

  1. Maenaka, K. et al. (2001) J. Biol. Chem. 276, 44898-44904.
  2. Fridman, W. H. et al. (1992) Immunol. Rev. 125, 49-76.
  3. Pignata, C. et al. (1993) J. Immunol. 151, 6794-6800.
  4. Pincetic, A. et al. (2014) Nat Immunol 15, 707-16.
  5. Nagler, A. et al. (1989) J Immunol 143, 3183-91.
  6. Fleit, H.B. et al. (1982) Proc Natl Acad Sci U S A 79, 3275-9.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

限制使用

除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意,否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件,除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受, 否书均被拒书,并且无效。

专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明, 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的, 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专,且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的, 或专专售(专独或作专专成)或其他商专目的而专专专品,均需要 CST 的专独专可。客专:(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品,或使用专品制造任何商专专品,(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专,或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专, (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专,(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品, (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专

仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
Cy 和 CyDye 是 GE Healthcare 的注册商标。
Powered by Translations.com GlobalLink OneLink SoftwarePowered By OneLink