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50165
CD109 (E8L2W) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
偶联抗体
单克隆抗体

CD109 (E8L2W) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #50165

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筛选器:
  1. F
Flow Cytometry Image 1: CD109 (E8L2W) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
使用 CD109 (E8L2W) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)(顶行)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #2975(底行)和共染色的 CD4 (RPA-T4) Mouse mAb (APC Conjugate) #78292 对未经处理(左栏)或已经过交联抗 CD3 + 抗 CD28(各 10 μg/ml,72 小时;右栏)处理的人外周血单核细胞进行流式细胞分析。
购买 # 50165S
产品货号 规格 价格 库存
50165S
100 µl (50 次测试)

支持数据

反应性 H
敏感性 内源性
MW (kDa)
来源/亚型 兔 IgG

应用缩写:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术
  • E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性缩写:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴子
  • Vir- Virus
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-狗
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品说明

Cell Signaling Technology 的这种抗体接合 Alexa Fluor® 488 荧光染料,并可对人体细胞进行直接的流式细胞分析内部检测。该生物素化抗体显示的物种交叉反应性预计与非偶联的 CD109 (E8L2W) Rabbit mAb #48695 相同。

产品使用信息

应用 稀释度
流式细胞术 1:50

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实验步骤

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流式细胞术,针对直接结合抗体的活细胞实验步骤

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。

  1. 1X 磷酸盐缓冲液 (PBS):要制备 1 L 1X PBS:添加 100 ml 10X PBS (#12528) 到 900 ml 水中混合。
  2. 抗体稀释缓冲液:购买即用型流式细胞术抗体稀释缓冲液 (#13616),或在 100 ml 1x PBS 中溶解 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 来制备 0.5 % BSA PBS 缓冲液。储存在 4°C。

注意:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活性染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经流式细胞术验证的细胞染料完整列表

B. 免疫染色

:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。

注意:如果使用全血,则需裂解红血细胞,并在免疫染色之前通过离心分离洗涤。

注意:理想的离心条件根据细胞类型和试剂容量有所不同。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀。

  1. 将所需数量的细胞分装进试管或加样孔中。(通常,每次实验 5 x 105 至 1 x 106 个细胞。)
  2. 进行离心使细胞沉淀,并去除上清液。
  3. 在 100 µl 稀释的一抗中重悬细胞,稀释的一抗按建议的稀释度或根据滴定确定用抗体稀释缓冲液制备。
  4. 在冰上孵育 30 分钟至 1 小时。避光保存。
  5. 用抗体稀释缓冲液进行离心洗涤。丢弃上清液。重复操作。
  6. 在 200-500 μl 抗体稀释缓冲液中重悬细胞后用流式细胞分析仪进行分析。

发布​于 2017 年 6 月 

修订于 2020 年 6 月

实验步骤编号:1504

特异性/敏感性

CD109 (E8L2W) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) 可检测 CD109 总蛋白的内源水平。

物种反应性:

来源/纯化

使用与人 CD109 蛋白中 Gly653 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

CD109 是一种糖基磷脂酰肌醇 (GPI) 连接的糖蛋白,属于含硫酯的蛋白的 α2 巨球蛋白家族 (1)。CD109 能结合 TGF-β 受体 I (TbRI),并抑制 TGF-β 信号转导 (2,3)。CD109 在其 Furin 裂解活化位点的裂解活化会释放其较大的氨基末端结构域,这个结构域随后结合 TGF-β 受体 I,从而抑制 TGF-β 信号转导 (4-7)。CD109 在 CD34+ 骨髓细胞和间充质干细胞、激活的血小板、激活的 T 细胞、内皮细胞和各种肿瘤细胞亚群中表达 (8-10)。CD109 表达升高被认为是多种癌症的诊断/预后标记 (11-14)。
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通路和蛋白

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