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50165
CD109 (E8L2W) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
抗体偶联物
单克隆抗体

CD109 (E8L2W) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #50165

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筛选器:
  1. F
Flow Cytometry Image 1: CD109 (E8L2W) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
使用 CD109 (E8L2W) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)(顶行)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #2975(底行)和共染色的 CD4 (RPA-T4) Mouse mAb (APC Conjugate) #78292 对未经处理(左栏)或已经过交联抗 CD3 + 抗 CD28(各 10 μg/ml,72 小时;右栏)处理的人外周血单核细胞进行流式细胞分析。
To Purchase # 50165S
目录# 规格 价格 库存
50165S
100 µl (50 次检测)

支持性数据

反应性 H
灵敏度 内源性
MW (kDa)
来源/同种型 兔 IgG

应用关键词:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品说明

这种 Cell Signaling Technology 抗体偶联于 Alexa Fluor® 488 荧光染料,并针对人细胞中直接流式细胞分析接受内部检测。该生物素化抗体显示的物种交叉反应性预计与非偶联的 CD109 (E8L2W) Rabbit mAb #48695 相同。

产品使用信息

应用 稀释度
流式细胞术 1:50

保存

保存在 PBS(pH 为 7.2)、低于 0.1 % 的叠氮化钠和 2 mg/ml BSA 中。4°C 保存。切勿分装抗体。避光保存。切勿冷冻。

实验步骤

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流式细胞术,针对直接结合抗体的活细胞实验步骤

A. 溶液与试剂

:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。

  1. 1 X 磷酸盐缓冲生理盐水 (PBS):要配制 1 L 1X PBS:将 100 ml 10X PBS (#12528) 添加到 900 ml 水,混合。
  2. 抗体稀释缓冲液:购买即用型流式细胞术抗体稀释缓冲液 (#13616),或在 100 ml 1x PBS 中溶解 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 来配制 0.5 % BSA PBS 缓冲液。4°C 保存。

:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活力指示染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品网页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经验证用于流式细胞术的细胞染料完整列表。

B. 免疫染色

:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。

:如果使用全血,则需裂解红血细胞,并在免疫染色之前通过离心分离洗涤。

:人 Fc 受体与兔 IgG 发生交叉反应。当感兴趣的细胞表达高水平的 Fc 受体蛋白(例如,巨噬细胞/单核细胞谱系)时,在用兔抗体进行免疫染色之前,用人 Fc 块预孵育活细胞。

:最佳离心条件会根据细胞类型和试剂容量变动。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀下来。

  1. 将所需数目的细胞分装入试管或小孔中。(通常,每次测定 5 x 105 至 1 x 106 个细胞。)
  2. 通过离心使细胞沉淀下来,移除上清液。
  3. 在 100 µl 稀释的一抗中重悬细胞,这种一抗按建议的稀释度或如通过滴定所确定那样以抗体稀释缓冲液配制。
  4. 在冰上孵育 30 分钟至 1 小时。避光。
  5. 用抗体稀释缓冲液进行离心洗涤。弃去上清液。重复。
  6. 在 200-500 μl 抗体稀释缓冲液中重悬细胞后用流式细胞分析仪进行分析。

发布​时间 2017 年 6 月

修订时间 2022 年 1 月

实验步骤编号:1504

特异性/灵敏度

CD109 (E8L2W) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) 可检测 CD109 总蛋白的内源水平。

物种反应性:

来源/纯化

使用与人 CD109 蛋白中 Gly653 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

CD109 是一种糖基磷脂酰肌醇 (GPI) 连接的糖蛋白,属于含硫酯的蛋白的 α2 巨球蛋白家族 (1)。CD109 能结合 TGF-β 受体 I (TbRI),并抑制 TGF-β 信号转导 (2,3)。CD109 在其 Furin 裂解活化位点的裂解活化会释放其较大的氨基末端结构域,这个结构域随后结合 TGF-β 受体 I,从而抑制 TGF-β 信号转导 (4-7)。CD109 在 CD34+ 骨髓细胞和间充质干细胞、激活的血小板、激活的 T 细胞、内皮细胞和各种肿瘤细胞亚群中表达 (8-10)。CD109 表达升高被认为是多种癌症的诊断/预后标记 (11-14)。
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通路与蛋白质

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