反应性 | H Mk |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
流式细胞术(固定/通透) | 1:50 |
本实验步骤中所需的所有试剂均可与我公司的 Intracellular Flow Cytometry Kit (Triton™ X-100) #51995 一并高效购买,或使用下文所列的货号单独购买。
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
注:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活力指示染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品网页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经验证用于流式细胞术的细胞染料完整列表。
注:固定前,贴壁细胞或组织应予以解离并处于单细胞悬液中。
注:最佳离心条件会根据细胞类型和试剂容量变动。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀下来。
注:如果使用全血,则在固定前裂解红细胞并通过离心来洗涤。
注:如果表位遭甲醛和/或 Triton™ X-100 破坏,则可在固定前添加靶向 CD 标志物或其他胞外蛋白的抗体。在固定和透化过程期间,这类抗体将保持与目的靶标结合。如果您不确定,请进行小规模实验。
注:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
发布时间 2017 年 1 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:1344
人, 猴
使用与人 C/EBPβ 蛋白中 Gly67 周围残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
CCAAT/增强子结合蛋白 (C/EBP) 是一个转录因子家族,对细胞分化、晚期功能和炎症反应十分关键 (1)。目前已确定该家族有 6 个成员 (C/EBPα, β, γ, δ, ε, ζ),它们分布在不同组织中 (1)。C/EBPβ 有两种形式,即 38 kDa 的肝激活蛋白 (LAP) 和 20 kDa 的肝抑制蛋白 (LIP),它们可能是选择性翻译的产物。38 kDa LAP 蛋白是一种转录激活剂,而 LIP 则是 C/EBPβ 转录活性的抑制剂 (2)。C/EBPβ 在不同位点的磷酸化会刺激其转录活性 (3-5)。大鼠 C/EBPβ 在 Serine 105 位点(一个仅存在于大鼠序列的独特位点)的磷酸化对大鼠 C/EBPβ 的激活至关重要 (6)。
探索与本品相关的通路。
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