与传统抗体相比，重组抗体具有几个关键优势。这些包括良好的批次间一致性，持续供应以及对抗体工程的适应性。因此，重组抗体在科学研究中的应用日益广泛，特别是作为解决持续存在的可重复性难题的一种手段。
传统的多克隆和单克隆抗体是正常 B 细胞发育和基因重组的产物。它们是通过用抗原免疫动物以引发免疫应答而产生的。多克隆抗体由许多不同的 B 细胞克隆分泌并识别多个抗原表位，而单克隆抗体则来自单个 B 细胞克隆，并且仅对单个表位具有特异性。
重组抗体是单克隆抗体，但是其生产涉及体外基因操作。将抗体基因克隆到表达载体中后，将其转染到合适的宿主细胞系中进行抗体表达。哺乳动物细胞系最常用于重组抗体的生产，然而细菌、酵母或昆虫来源的细胞系也适用。
由于重组抗体的生产涉及对抗体轻链和重链进行测序，因此这是一个高度可控且可靠的过程。相反，用于生产单克隆抗体的基于杂交瘤的系统容易发生遗传漂移和不稳定，从而增加了批次间变异或抗体表达缺失的可能性。重组抗体在批次之间高度一致，从而确保了可重复的实验结果。
体外生产抗体的方法适合大规模生产，这意味着抗体的可获得性不太可能成为限制因素。此外，由于重组抗体序列是已知的，因此确保了供应的连续性；如需将抗体用于大规模长期研究，这可能就是一个至关重要的因素。
与传统的抗体生产方法不同，重组方法避免了使用动物的需要。多克隆抗体直接从免疫宿主血清中纯化，单克隆抗体从杂交瘤来源的组织培养上清液 (TCS) 或腹水中纯化，而重组抗体是从转染宿主细胞系的 TCS 中纯化。无论抗体是多克隆抗体、单克隆抗体还是重组抗体，在实验使用前都必须在预期应用中对其进行适当验证。在CST，我们遵守抗体验证标志，即在任何特定实验方法中的确定抗体特异性、敏感性和功能性的六个互补策略。通过针对每种抗体产品精心定制这些策略，我们保证 CST 抗体的适用性，以帮助您获得可信赖的结果。
| 反应性 | H |
| 灵敏度 | 内源性 |
| MW (kDa) | |
| 来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
| 应用 | 稀释度 |
|---|---|
| 流式细胞术（活性） | 1:50 |
注：使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
注：在您的实验中加入荧光细胞染料（包括活力指示染料、DNA 染料等）时，请参考染料产品网页，了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com，了解经验证用于流式细胞术的细胞染料完整列表。
注：使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
注：如果使用全血，则需裂解红血细胞，并在免疫染色之前通过离心分离洗涤。
注：人 Fc 受体与兔 IgG 发生交叉反应。当感兴趣的细胞表达高水平的 Fc 受体蛋白（例如，巨噬细胞/单核细胞谱系）时，在用兔抗体进行免疫染色之前，用人 Fc 块预孵育活细胞。
注：最佳离心条件会根据细胞类型和试剂容量变动。一般，1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀下来。
发布时间 2017 年 6 月
修订时间 2022 年 1 月
实验步骤编号：1504
人
使用人 BST2 重组蛋白对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
BST2 (CD317, Tetherin, HM1.24) 是一种 II 型跨膜糖蛋白，可作为先天免疫通过细胞表面系链病毒体防御包膜病毒传播的主要介体 (1)。BST2 具有一个用于内吞和细胞骨架信号转导的 N 末端胞质尾区、一个跨膜结构域、一个含可能二硫键和用于形成同型二聚体的卷曲螺旋区的胞外结构域，以及一个用于膜锚定的 C 末端 GPI 结构域 (2,3)。跨膜结构域和 GPI 结构域均可以插入到细胞膜或病毒包膜，且将它们结合在一起以防止病毒释放。一些病毒分别编码 HIV-1 和 Vpu 等蛋白质，作为对抗 BST2 的拮抗剂 (2,3)。BST2 在胃肠癌、乳腺癌、肺癌和多发性骨髓癌中过表达 (4-7)。靶向骨髓癌或肺癌的 BST2 单克隆抗体可诱发细胞毒性和细胞死亡（ADCC，抗体依赖性细胞介导的细胞毒性）。因此 BST2 可作为肿瘤免疫治疗的潜在靶标。
除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意，否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件，除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受， 否书均被拒书，并且无效。
专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明， 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的， 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专，且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的， 或专专售（专独或作专专成）或其他商专目的而专专专品，均需要 CST 的专独专可。客专：(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品，或使用专品制造任何商专专品，(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专，或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专， (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专，(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品， (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专
PhosphoSitePlus® 中查看