反应性 | H M |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
流式细胞术(固定/通透) | 1:50 |
本实验步骤中所需的所有试剂可与我们的 Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593 一起高效购买,或使用下文所列的货号单独购买。
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
注:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活力指示染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品网页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经验证用于流式细胞术的细胞染料完整列表。
注:固定前,贴壁细胞或组织应予以解离并处于单细胞悬液中。
注:最佳离心条件会根据细胞类型和试剂容量变动。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀下来。
注:如果使用全血,则在固定前裂解红细胞并通过离心来洗涤。
注:如果表位被甲醛和/或甲醇破坏,可以在固定前添加靶向 CD 标记物或其他胞外蛋白质的抗体。在固定和透化过程期间,这类抗体将保持与目的靶标结合。但注意,某些荧光团(包括 PE 和 APC)会被甲醇损坏,因此不应在透化前添加。如果您不确定,请进行小规模实验。
注:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
发布时间 2009 年 7 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:407
人, 小鼠
使用与人 BATF 蛋白中羧基末端周围的残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
碱性亮氨酸拉链转录因子 ATF 样 (BATF) 是一种碱性亮氨酸拉链 (bZIP) 转录因子并且是与 Jun 家族成员形成抑制性二聚体的 AP-1/ATF 家族的组成部分 (1-3)。BATF 的表达大多受限制,成熟 T 细胞中水平最高,并且它在免疫应答(包括病毒性感染)后的 B 细胞中被诱导 (1,2)。借助 Stat3-依赖性机制,BATF 表达还受 IL-6 诱导 (4)。BATF 在免疫细胞谱系的分化中发挥重要作用 (5-7)。对 BATF-缺陷小鼠的研究已经展示了 BATF 在形成表达 IL-17 的 Th17 细胞中的至关重要作用,这部分地依据调节 IL-17 的表达做到 (5,6)。BATF 敲除动物抵抗实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EEA),与这个自身免疫性模型中 Th17 细胞的作用一致 (5)。附加研究已经发现,BATF 在产生抗体类别转换中是重要的。通过调节 BCL6 和 c-Maf,BATF 是产生滤泡性辅助 T 细胞所需要的 (Tfh)、 (6,7)。在 B 细胞中,BATF 控制激活诱导的胞苷脱氨酶 (AID) 的表达并且调节类别转换的抗体应答 (7)。综上,这些研究表明,BATF 是不同免疫细胞群体的关键调节物。
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