反应性 | H M |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
流式细胞术(固定/通透) | 1:50 |
本实验步骤中所需的所有试剂可与我们的 Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593 一起高效购买,或使用下文所列的货号单独购买。
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
注:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活力指示染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品网页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经验证用于流式细胞术的细胞染料完整列表。
注:固定前,贴壁细胞或组织应予以解离并处于单细胞悬液中。
注:最佳离心条件会根据细胞类型和试剂容量变动。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀下来。
注:如果使用全血,则在固定前裂解红细胞并通过离心来洗涤。
注:如果表位被甲醛和/或甲醇破坏,可以在固定前添加靶向 CD 标记物或其他胞外蛋白质的抗体。在固定和透化过程期间,这类抗体将保持与目的靶标结合。但注意,某些荧光团(包括 PE 和 APC)会被甲醇损坏,因此不应在透化前添加。如果您不确定,请进行小规模实验。
注:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
发布时间 2009 年 7 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:407
人, 小鼠
通过采用与人 BATF 蛋白的羧基末端附近的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
碱性亮氨酸拉链转录因子 ATF 样 (BATF) 是一种碱性亮氨酸拉链 (bZIP) 转录因子并且是与 Jun 家族成员形成抑制性二聚体的 AP-1/ATF 家族的组成部分 (1-3)。BATF 的表达大多受限制,成熟 T 细胞中水平最高,并且它在免疫应答(包括病毒性感染)后的 B 细胞中被诱导 (1,2)。借助 Stat3-依赖性机制,BATF 表达还受 IL-6 诱导 (4)。BATF 在免疫细胞谱系的分化中发挥重要作用 (5-7)。对 BATF-缺陷小鼠的研究已经展示了 BATF 在形成表达 IL-17 的 Th17 细胞中的至关重要作用,这部分地依据调节 IL-17 的表达做到 (5,6)。BATF 敲除动物抵抗实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EEA),与这个自身免疫性模型中 Th17 细胞的作用一致 (5)。附加研究已经发现,BATF 在产生抗体类别转换中是重要的。通过调节 BCL6 和 c-Maf,BATF 是产生滤泡性辅助 T 细胞所需要的 (Tfh)、 (6,7)。在 B 细胞中,BATF 控制激活诱导的胞苷脱氨酶 (AID) 的表达并且调节类别转换的抗体应答 (7)。综上,这些研究表明,BATF 是不同免疫细胞群体的关键调节物。
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