反应性 | H M R Mk B Pg |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
免疫荧光法(免疫细胞化学) | 1:25 - 1:100 |
流式细胞术(固定/通透) | 1:50 |
注意:用反渗透去离子 (RODI) 水或等效净化水制备溶液。
注意:细胞应当在多孔板、腔室玻片或盖玻片上直接培养、处理、固定和染色。
注意:所有随后的孵育都应当在室温下完成,除非另有注明需要在避光湿盒或带盖的培养皿/板中孵育,以防止干燥和荧光物质淬灭。
发布时间 2006 年 11 月
修订时间 2010 年 12 月
实验步骤编号:220
本实验步骤中所需的所有试剂可与我们的 Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593 一起高效购买,或使用下文所列的货号单独购买。
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
注:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活力指示染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品网页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经验证用于流式细胞术的细胞染料完整列表。
注:固定前,贴壁细胞或组织应予以解离并处于单细胞悬液中。
注:最佳离心条件会根据细胞类型和试剂容量变动。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀下来。
注:如果使用全血,则在固定前裂解红细胞并通过离心来洗涤。
注:如果表位被甲醛和/或甲醇破坏,可以在固定前添加靶向 CD 标记物或其他胞外蛋白质的抗体。在固定和透化过程期间,这类抗体将保持与目的靶标结合。但注意,某些荧光团(包括 PE 和 APC)会被甲醇损坏,因此不应在透化前添加。如果您不确定,请进行小规模实验。
注:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
发布时间 2009 年 7 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:407
人, 小鼠, 大鼠, 猴, 牛 , 猪
仓鼠 , 鸡 , 犬 , 马, 兔
使用与人 β-肌动蛋白氨基末端周围的残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
作为一种普遍表达的真核蛋白,肌动蛋白是细胞骨架的一种主要组分。哺乳动物至少有 6 种已知的同工型。非肌肉 β 和 γ 肌动蛋白(也称细胞浆肌动蛋白)主要在非肌肉细胞中表达,可控制细胞结构和运动 (1)。所有肌动蛋白同工型都是高度同源的,细胞质 β- 和 γ 肌动蛋白序列仅因四种生化类似的氨基酸而异 (2)。因此,升高至 β 肌动蛋白的抗体可能与 γ 肌动蛋白发生交叉反应,反之亦然。α-心脏和 α 骨骼肌动蛋白在带状心脏和骨骼肌中表达,分别分别;两个平滑肌肉女演员,α- 和 γ-肌动蛋白,主要发现在血管平滑肌肉和肠道平滑肌肉中,。这些肌蛋白同工型可调节肌肉细胞收缩能力 (1)。肌动蛋白主要作为一种纤维聚合物纤丝状肌动蛋白而存在。在一些进程(如胞质分裂、内吞或应激)中,在细胞骨架重组信号的刺激下,丝切蛋白促进纤丝状肌动蛋白的片段化和解聚合导致单体球状形式球型肌动蛋白的增加 (3)。Arp2/3 复合体可稳定纤丝状肌动蛋白片段,并促进新肌动蛋白丝的形成 (3)。研究表明,肌动蛋白在原发性乳腺癌中被过度磷酸化 (4)。研究也表明,已经在体外、心肌和骨骼肌中观察到凋亡条件下的肌动蛋白的剪切 (5-7)。被 caspase-3 剪切的肌动蛋白,会加速泛素/蛋白酶体依赖的肌肉蛋白水解 (7)。
探索与本品相关的通路。
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