反应性 | H M R |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | 72 |
来源/亚型 | 兔 IgG |
产品信息
Cell Signaling Technology 的这种抗体在最合适的条件下偶联生物素。该生物素化抗体显示的物种交叉反应性预计与非偶联的 Atg13 (D4P1K) Rabbit mAb #13273 相同。
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
保存在 136 mM NaCl、2.6 mM KCI、12 mM 磷酸氢二钠(pH 为 7.4)、2 mg/ml BSA 和 50 % 甘油中。存储温度为 -20℃。不要分装抗体。
蛋白质印迹法就是将膜与 5% w/v 脱脂奶粉、1X TBS 以及 0.1% Tween® 20 中的稀释的一抗在 4°C 下进行夜间孵育,同时轻轻晃动。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#13953,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
请勿加入用于检测生物素化蛋白标准品的 Anti-biotin, HRP-linked Antibody。没有必要。Streptavidin-HRP 也将会使生物素化标准品可视化。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:265
Atg13 (D4P1K) Rabbit mAb (Biotinylated) 可检测 Atg13 总蛋白的内源水平。
人, 小鼠, 大鼠
使用与人 Atg13 蛋白 Asp462 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
自噬是自噬溶酶体降解大部分细胞浆内容物的一种分解代谢过程 (1,2)。通常在营养剥夺条件下激活自噬,但自噬也与一些生理过程有关,如发育、分化、神经变性、感染和癌症 (3)。已在酵母中大量发现自噬的分子机制,被称为自噬基因 (Atg)。
Atg13/Apg13 最初作为一种结构性表达蛋白发现于酵母中,这种蛋白在基因层面与 Atg1/Apg1 相连,后者是自噬所需的一种蛋白激酶 (4)。Atg1 过表达会抑制在 Atg13 突变体中观察到的自噬缺陷 (4)。自噬过程需要 Atg1 与 Atg13 之间的直接结合,并且在高营养条件下受 Atg13 的 TOR 依赖性磷酸化的抑制 (5)。同样,哺乳动物的 Atg13 与 Atg1 同源蛋白 ULK1/2 和 FIP200 形成一个复合体,该复合体定位至自噬隔离膜并调节自噬体的生物合成 (6-8)。mTOR 磷酸化 Atg13 和 ULK1,进而抑制 ULK1 激酶活性和自噬 (7-9)。ULK1 可在一个尚未鉴定的位点直接磷酸化 Atg13,推测其可促进自噬 (7,8)。其他研究表明,Atg13 和 FIP200 的作用不受 ULK1 和 ULK2 的影响,并通过一种未知机制诱导自噬 (10)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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