反应性 | H M R Mk B Pg |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | |
来源/亚型 | 兔 IgG |
产品信息
Cell Signaling Technology 的这种抗体接合藻红蛋白 (PE),并可对人体细胞进行了直接的流式细胞术分析内部检测。该抗体的物种交叉反应性预计与非偶联的 Annexin A2 (D11G2) Rabbit mAb #8235 相同。
应用 | 稀释度 |
---|---|
流式细胞术 | 1:50 |
保存在 PBS(pH 为 7.2)、低于 0.1 % 的叠氮化钠和 2 mg/ml BSA 中。储存在 4°C。切勿分装抗体。避光保存。切勿冷冻。
本实验步骤中所需的所有试剂可与我们的 Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593 一起高效购买,或使用下文所列的货号单独购买。
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
注意:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活性染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经流式细胞术验证的细胞染料完整列表。
注:固定前,应分离黏附细胞或组织,并放在单细胞悬浮液中。
注意:理想的离心条件根据细胞类型和试剂容量有所不同。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀。
注意:如果使用全血,则需在固定前裂解红细胞并通过离心洗涤。
注意:如果表位被甲醛和/或甲醇破坏,可以在固定前添加靶向 CD 标记物或其他胞外蛋白的抗体。在固定和透化过程中,这类抗体保持结合目的靶标。但注意,某些荧光团(包括 PE 和 APC)会被甲醇损坏,因此不应在透化前添加。如果您不确定,请进行小规模实验。
注:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
发布于 2009 年 7 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:407
Annexin A2 (D11G2) Rabbit mAb (PE Conjugate) 可识别内源水平的总膜联蛋白 A2。不知或未预测到该抗体会与其他膜联蛋白家族成员发生交叉反应。
人, 小鼠, 大鼠, 猴, 牛 , 猪
犬 , 马
使用与人膜联蛋白 A2 的 Phe307 周围残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
膜连蛋白 A2 (ANXA2)(也称脂皮素 II 或依钙蛋白-1 重链)是 36 kDa 的膜联蛋白超家族成员,通过膜联蛋白重复序列以钙依赖的方式结合磷脂和其他蛋白质 (1)。膜联蛋白 A2 包含四个重复序列,并通过四个重复序列介导蛋白与蛋白、蛋白与脂质之间的相互作用 (1-4)。它与 S100A10 形成一种结构性异源四聚体,可作为肌动蛋白细胞骨架、质膜和内吞囊泡结构之间的桥梁 (5-7)。膜连蛋白 A2 最初被认定为磷脂酶 A2 的蛋白抑制剂,随后证明膜连蛋白 A2 与大量蛋白和非蛋白伴侣相互作用,包括纤丝状肌动蛋白、血影蛋白、SNARE 复合体、RNA 和病毒颗粒 (4,6,8,9)。经证明膜连蛋白 A2 还有受体样活性,可在巨噬细胞和血管内皮细胞表面检测到,并分别介导巨噬细胞激活和凝血因子 Xa 信号转导 (10-13)。细胞表面膜连蛋白 A2 上调能通过 Src 磷酸化 Tyr23 进行调节 (14-18)。有趣的是,最近已证明细胞表面膜联蛋白 A2 的表达需要 Tyr23 磷酸化,在细胞表面,膜连蛋白 A2 介导某些胰腺癌细胞的运动性、侵犯以及整体转移潜能 (19,20)。膜连蛋白 A2 经证明还能在 PKC 激活后通过多效机制在丝氨酸残基被高度磷酸化 (21-23)。如需了解膜连蛋白 A2 磷酸化位点的完整列表,请访问 www.phosphosite.org PhosphoSitePlus®。
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