反应性 | H M |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
流式细胞术(固定/通透) | 1:50 |
本实验步骤中所需的所有试剂可与我们的 Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593 一起高效购买,或使用下文所列的货号单独购买。
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
注:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活力指示染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品网页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经验证用于流式细胞术的细胞染料完整列表。
注:固定前,贴壁细胞或组织应予以解离并处于单细胞悬液中。
注:最佳离心条件会根据细胞类型和试剂容量变动。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀下来。
注:如果使用全血,则在固定前裂解红细胞并通过离心来洗涤。
注:如果表位被甲醛和/或甲醇破坏,可以在固定前添加靶向 CD 标记物或其他胞外蛋白质的抗体。在固定和透化过程期间,这类抗体将保持与目的靶标结合。但注意,某些荧光团(包括 PE 和 APC)会被甲醇损坏,因此不应在透化前添加。如果您不确定,请进行小规模实验。
注:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
发布时间 2009 年 7 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:407
人, 小鼠
使用与人 Aiolos 蛋白 Pro46 周围的残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
Aiolos 是一种 Ikaros 家族转录因子,包含多种锌指结构,这些结构可介导 DNA 结合以及与其他 Ikaros 家族成员发生的同源二聚化或异源二聚化 (1)。通过可编码氨基末端锌指结构的部分转录基因所发生的选择性剪切来可产生多种 Aiolos 同工型 (2)。Aiolos 在淋巴组织中表达,其在成熟 B 和 T 细胞中的表达水平最高 (1)。Ikaros 家族蛋白通过将染色质重塑复合体募集到 DNA 来控制淋巴细胞发育 (3)。Aiolos 缺失小鼠的 B 细胞激活阈值降低,增殖增强并且 IgG 和 IgE 水平升高。此外,Aiolos 缺陷型小鼠会出现 B 细胞淋巴瘤 (4)。在 T 细胞中,Aiolos 可通过抑制 IL-2 表达促进 Th17 细胞分化 (5)。Aiolos 在转化上皮细胞中的异常表达会通过下调黏附相关基因而促进锚定非依赖性 (6)。在周围的单倍体急性淋巴细胞性白血病中可观察到 Aiolos 基因表达改变,并且包含 Aiolos 的基因位点与类风湿关节炎和系统性红斑狼疮的易感性增加有关 (7-9)。
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