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55528
ACE2 (E1E1I) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
抗体偶联物
单克隆抗体

ACE2 (E1E1I) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #55528

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筛选器:
  1. F
Flow Cytometry Image 1: ACE2 (E1E1I) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
Flow cytometric analysis of live HCT 116 cells (blue, negative) and IGROV-1 cells (green, positive) using ACE2 (E1E1I) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) (solid lines) or concentration-matched Mouse (E7Q5L) mAb IgG2b Isotype Control (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #20361 (dashed lines).
To Purchase # 55528S
目录# 规格 价格 库存
55528S
100 µl (50 次检测)

支持性数据

反应性 H M
灵敏度 内源性
MW (kDa)
来源/同种型 小鼠 IgG2b、kappa

应用关键词:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • GP-豚鼠
  • Rab-Rabbit
  • All-预期所有物种

产品说明

Cell Signaling Technology® 的这种抗体在最佳条件下偶联于 Alexa Fluor®488 荧光染料,并针对人细胞中直接流式细胞分析接受内部测试。This antibody conjugate is expected to exhibit the same species cross-reactivity as the unconjugated ACE2 (E1E1I) Mouse mAb #46247.

产品使用信息

应用 稀释度
流式细胞术(活性) 1:50

保存

保存在 PBS (pH 为7.2)、低于 0.1 % 的叠氮化钠和 2 mg/ml BSA 中。4°C 保存。切勿分装抗体。避光保存。切勿冷冻。

实验步骤

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流式细胞术,针对直接结合抗体的活细胞实验步骤

A. 溶液与试剂

:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。

  1. 1 X 磷酸盐缓冲生理盐水 (PBS):要配制 1 L 1X PBS:将 100 ml 10X PBS (#12528) 添加到 900 ml 水,混合。
  2. 抗体稀释缓冲液:购买即用型流式细胞术抗体稀释缓冲液 (#13616),或在 100 ml 1x PBS 中溶解 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 来配制 0.5 % BSA PBS 缓冲液。4°C 保存。

:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活力指示染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品网页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经验证用于流式细胞术的细胞染料完整列表。

B. 免疫染色

:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。

:如果使用全血,则需裂解红血细胞,并在免疫染色之前通过离心分离洗涤。

:人 Fc 受体与兔 IgG 发生交叉反应。当感兴趣的细胞表达高水平的 Fc 受体蛋白(例如,巨噬细胞/单核细胞谱系)时,在用兔抗体进行免疫染色之前,用人 Fc 块预孵育活细胞。

:最佳离心条件会根据细胞类型和试剂容量变动。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀下来。

  1. 将所需数目的细胞分装入试管或小孔中。(通常,每次测定 5 x 105 至 1 x 106 个细胞。)
  2. 通过离心使细胞沉淀下来,移除上清液。
  3. 在 100 µl 稀释的一抗中重悬细胞,这种一抗按建议的稀释度或如通过滴定所确定那样以抗体稀释缓冲液配制。
  4. 在冰上孵育 30 分钟至 1 小时。避光。
  5. 用抗体稀释缓冲液进行离心洗涤。弃去上清液。重复。
  6. 在 200-500 μl 抗体稀释缓冲液中重悬细胞后用流式细胞分析仪进行分析。

发布​时间 2017 年 6 月

修订时间 2022 年 1 月

实验步骤编号:1504

特异性/灵敏度

ACE2 (E1E1I) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) recognizes endogenous levels of total ACE2 protein.

物种反应性:

人, 小鼠

来源/纯化

使用对人 ACE2 蛋白的氨基末端具有特异性的重组蛋白对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

ACE2 是一种羧肽酶,能够催化血管紧张素 I 转换成血管紧张素 1-9 或者将血管紧张素 II 转换成血管舒张血管紧张素 1-7(1)。ACE2 是高血压蛋白原酶-血管紧张素系统 (RAS) 中一个至关重要的组分。ACE2 主要在心脏和肾脏的血管内皮细胞以及睾丸的 Leydig 和 Sertoli 细胞中表达 (2,3)。ACE2 独特的表达模式决定了它在心血管、肾脏以及生育调控中的重要角色。ACE2 蛋白主要位于细胞外空间,其羧基末端通过跨膜结构域与膜相连。在氨基末端剪切后,活性 ACE2 酶被分泌。研究发现, ACE2 在衰竭的人类心脏中的表达升高 (4)。ACE2 还被发现是 SARS 和 SARS-CoV-2 冠状病毒的受体 (5-7)。

限制使用

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仅供研究使用。不得用于诊断程序。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
Alexa Fluor 是 Life Technologies 公司的注册商标。
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