结合磷酸化苏氨酸肽（红色）的 PLK1 PBD。
POLO 盒结构域只在 Polo 样激酶家族中被发现，这些家族激酶可调节有丝分裂进入、纺锤体组装、中心体成熟、染色体分离、胞质分裂和细胞周期停滞。大约有 200 个氨基酸的 POLO 盒结构域包含两个高度保守的 Polo 盒基序，每个基序大约有 70-80 个氨基酸，并且位于羧基末端-氨基末端丝氨酸/苏氨酸激酶结构域。POLO 盒结构域在确定激酶结构域的亚细胞定位和自抑制调节中发挥双重作用。POLO 盒模块包含两个 POLO 盒基序、它们之间的区域以及激酶结构域末端和第一个 POLO 盒之间的一部分连接物。这个模块可检测含核心共有基序 Ser-pThr/pSer-Pro/X 的磷酸肽。此外，PLK1 在各种人肿瘤细胞中过表达，表明它在癌变中发挥作用。
POLO 盒结构域包含两个 β6α 基序，这两个基序含有两个 POLO 盒区域（PB1 和 2）。两个 POLO 盒基序形成一个 12-链 β-夹心，β-夹心两侧各有三个 α 螺旋片段。虽然两个 POLO 盒均包含由一个 α-螺旋保护的 6-链反向平行 β-片层，但这两个 POLO 盒仅显示 12% 的序列同源性。磷酸肽与 PB1 的 β1、PB2 的 L2 和 β8/9 的氨基末端相互作用。与磷酸基团相互作用的唯一残基是 PB2 的 His-538 和 Lys-540。这些磷酸肽相互作用残基在 POLO 样激酶中高度保守，表明在所有家族成员内结合磷酸肽基序的能力较保守。
| POLO 样激酶 | 结合伴侣 |
| Plk1 | Cdc25C, Chk2, Mcm7, GRASP65 |
[Pro/Phe]-[φ/Pro]-[φ/Ala/Gln]-[Thr/Gln/His/Met]-Ser-[pThr/pSer]-[Pro/X]