Revision 1

#56674Store at -20C

1 个试剂盒

(8 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
CTGF (D8Z8U) Rabbit mAb 86641 20 µl 35 kDa Rabbit IgG
CYR61 (D4H5D) XP® Rabbit mAb 14479 20 µl 41 kDa Rabbit IgG
IGFBP3 (D1U9C) Rabbit mAb 25864 20 µl 40 kDa Rabbit IgG
Integrin β2 (D4N5Z) Rabbit mAb 73663 20 µl 95 kDa Rabbit IgG
Survivin (71G4B7) Rabbit mAb 2808 20 µl 16 kDa Rabbit IgG
Axl (C89E7) Rabbit mAb 8661 20 µl 138 kDa Rabbit IgG
Pan-TEAD (D3F7L) Rabbit mAb 13295 20 µl 50, 53, 55, 60 kDa Rabbit IgG
Lamin B2 (D8P3U) Rabbit mAb 12255 20 µl 68 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit provides an economical means of detecting proteins whose transcription is subject to regulation by the transcriptional co-activators YAP and/or TAZ. The kit provides enough antibody to perform two western blot experiments with each primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

YAP and TAZ (WWTR1) are transcriptional co-activators that play a central role in the Hippo Signaling pathway that regulates cell, tissue and organ growth. Under growth conditions, YAP and TAZ are translocated to the nucleus, where they interact with DNA-binding transcription factors (e.g., Transcriptional Enhanced Activation Domain [TEAD] proteins) to regulate the expression of genes that control fundamental aspects of cell function, such as proliferation and cell survival (1). A number of genes have been experimentally confirmed as targets of transcriptional regulation by YAP and TAZ. These include the extracellular matrix proteins CTGF, CYR61, and integrin β2 (2-4), the inhibitor of apoptosis protein (IAP) survivin (5), the mechano-sensitive nuclear envelope protein Lamin B2 (6), and the oncogenic receptor tyrosine kinase Axl (7).

  1. Holden, J.K. and Cunningham, C.N. (2018) Cancers (Basel) 10, .
  2. Zhang, H. et al. (2009) J Biol Chem 284, 13355-62.
  3. Chan, S.W. et al. (2011) J Biol Chem 286, 7018-26.
  4. Chan, S.W. et al. (2011) Oncogene 30, 600-10.
  5. Zhang, W. et al. (2015) Cancer Res 75, 4450-7.
  6. Zanconato, F. et al. (2015) Nat Cell Biol 17, 1218-27.
  7. Cui, Z.L. et al. Int J Immunopathol Pharmacol 25, 989-1001.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    U.S. Patent No. 7,429,487, foreign equivalents, and child patents deriving therefrom.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

    限制使用

    除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意,否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件,除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受, 否书均被拒书,并且无效。

    专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明, 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的, 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专,且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的, 或专专售(专独或作专专成)或其他商专目的而专专专品,均需要 CST 的专独专可。客专:(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品,或使用专品制造任何商专专品,(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专,或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专, (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专,(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品, (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专

    Revision 1
    #56674

    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit

    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 Pan-TEAD (D3F7L) Rabbit mAb #13295 对 HepG2 细胞的裂解物 (1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 Survivin (71G4B7) Rabbit mAb #2808 对 Jurkat 细胞的裂解物 (1.0 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:50 和 1:250 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:50(蓝线)和 1:250(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb #8661 对 HeLa 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的单一靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 Lamin B2 (D8P3U) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 TEAD1 (D9X2L) Rabbit mAb #12292 (A)、TEAD2 Antibody #8870 (B)、TEAD3 Antibody (C) 或 Pan-TEAD (D3F7L) Rabbit mAb #13295 (D) 对转染带有 Myc/DDK 标签的人全长 TEAD1 (hTEAD1-Myc/DDK;+)、带有 Myc/DDK 标签的人全长 TEAD2 (hTEAD2-Myc/DDK;+)、带有 Myc/DDK 标签的人全长 TEAD3 (hTEAD3-Myc/DDK;+) 或带有 Myc/DDK 标签的人全长 TEAD4 (hTEAD4-Myc/DDK;+) 的表达载体的 COS-7 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 CYR61 (D4H5D) XP® Rabbit mAb(上)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下)对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。正如预期,MCF7 细胞的 CYR61 表达呈阴性。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 IGFBP3 (D1U9C) Rabbit mAb 对不同细胞系浓缩培养物进行蛋白质印迹分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 Survivin (71G4B7E) Rabbit mAb 对 Raji(人)、BaF3(小鼠)和 C6(大鼠)细胞系裂解物进行蛋白质印迹分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 Integrin β2 (D4N5Z) Rabbit mAb(上)或 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487(下),对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb #8661(上图)或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对未经处理 (-) 或 Axl 敲除型 (+) HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 CTGF (D8Z8U) Rabbit mAb(上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。星号表示在蛋白质印迹分析中使用该抗体检测到的 120 kDa 未知条带。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 Lamin B2 (D8P3U) Rabbit mAb(泳道3),对 Jurkat 细胞提取物中的 Lamin B2 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 Lamin B2 (D8P3U) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 Pan-TEAD (D3F7L) Rabbit mAb 对转染带有 Myc/DDK 标签的人全长 TEAD1 (hTEAD1-Myc/DDK;+)、带有 Myc/DDK 标签的人全长 TEAD2 (hTEAD2-Myc/DDK;+)、带有 Myc/DDK 标签的人全长 TEAD3 (hTEAD3-Myc/DDK;+) 或带有 Myc/DDK 标签的人全长 TEAD4 (hTEAD4-Myc/DDK;+) 的表达载体的 COS-7 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 CYR61 (D4H5D) XP® Rabbit mAb(绿色),对未经处理(左)或经 Brefeldin A #9972 处理(10 μg/ml,过夜;中)的 Saos-2 细胞和未经处理的 MCF7 细胞(右)进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight 554 Phalloidin #13054(红色)标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4804(DNA 荧光染料)。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    对 HCC1937 细胞提取物 IGFBP3 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 为10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 IGFBP3 (D1U9C) Rabbit mAb。使用 IGFBP3 (D1U9C) Rabbit mAb 执行蛋白质印迹分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 Survivin (71G4B7E) Rabbit mAb #2808 和 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125,对使用 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Fluorescein Conjugate) #6201 (-) 或 SignalSilence® Survivin siRNA II (+) 转染的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。Survivin (71G4B7E) Rabbit mAb 确认存活素表达的沉默,α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 用于存活素 siRNA 上样和特异性控制。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb(上)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 CTGF (D8Z8U) Rabbit mAb(绿色)和 Anti-Na+/K+ ATPase α Mouse mAb(蓝色)对 PANC-1 细胞(高表达)和 MCF7 细胞(低表达)进行共聚焦免疫荧光分析。红色 = Propidium Iodide (PI)/RNase Staining Solution #4087。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 Lamin B2 (D8P3U) Rabbit mAb(绿色)对 HCT 116 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 Pan-TEAD (D3F7L) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 CYR61 (D4H5D) XP® Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对 293T 细胞(蓝色)和 PANC-1 细胞(绿色)进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用 Survivin (71G4B7E) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人膀胱移行上皮癌进行免疫组织化学分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。注意浸润细胞的染色。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 Pan-TEAD (D3F7L) Rabbit mAb(泳道 3)对 COS-7 细胞提取物 TEAD 蛋白进行免疫沉淀分析。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 Pan-TEAD (D3F7L) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    使用 Survivin (71G4B7E) Rabbit mAb #2808 对石蜡包埋的人肺癌(显示胞核定位)进行免疫组织化学分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肾细胞癌进行免疫组织化学分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    在对照肽(左)或 Survivin Blocking Peptide #1037(右)存在的情况下,使用 Survivin (71G4B7E) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人 B 细胞非霍奇金淋巴瘤进行免疫组织化学分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    使用 Survivin (71G4B7E) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人垂体腺瘤进行免疫组织化学分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人卵巢浆液性癌进行免疫组织化学分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的转移性肺癌进行免疫组织化学分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 33 Expand Image
    使用 Survivin (71G4B7E) Rabbit mAb(绿色)对 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。已用 MitoTracker® Red CMXRos(红色)标记线粒体。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 34 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的细胞沉淀物 NCI-H1299(左)或 Jurkat(右)进行免疫组织化学分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 35 Expand Image
    使用 Survivin (71G4B7E) Rabbit mAb(蓝色),且对照非特异性阴性对照抗体(红色),对未处理的 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 36 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb(绿色)对 DU 145(左)和 HCC827(右)细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    YAP/TAZ Transcriptional Targets Antibody Sampler Kit: Image 37 Expand Image
    使用 Axl (C89E7H4) Rabbit mAb 对固定和透化的 Jurkat 细胞(蓝色,阴性)和 DU145 细胞(绿色,阳性)进行流式细胞术分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。