Revision 1

#8655Store at -20C

1 个试剂盒

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Cell Signaling Technology

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
CD44 (156-3C11) Mouse mAb 3570 20 µl 80 kDa Mouse IgG2a
Cyclin D1 (92G2) Rabbit mAb 2978 20 µl 36 kDa Rabbit IgG
c-Jun (60A8) Rabbit mAb 9165 20 µl 43, 48 kDa Rabbit IgG
LEF1 (C12A5) Rabbit mAb 2230 20 µl 25-58 kDa Rabbit IgG
Met (D1C2) XP® Rabbit mAb 8198 20 µl 140, 170 kDa Rabbit IgG
MMP-7 (D4H5) XP® Rabbit mAb 3801 20 µl 28, 20-22 kDa Rabbit 
c-Myc (D84C12) Rabbit mAb 5605 20 µl 57-65 kDa Rabbit IgG
TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb 2203 20 µl 48, 50 kDa Rabbit IgG
Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody 7076 100 µl Horse 
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit provides an economical means to investigate target proteins of the Wnt/β-Catenin signaling pathway. This kit contains enough primary antibody to perform two western blots per primary.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

The Wnt family includes several secreted glycoproteins that play important roles in animal development. β-catenin is a key downstream effector of the Wnt signaling pathway that research studies have shown is implicated in early embryonic development and tumorigenesis in vertebrates (1-3). Following binding of Wnt family proteins to the Frizzled receptor, β-catenin translocates to the nucleus where it interacts with LEF1 and TCF1 to activate canonical targets (4). Accepted canonical targets include CD44, cyclin D1, c-Jun, c-Myc, Met, and MMP-7 (5-11).

  1. Cadigan, K.M. and Nusse, R. (1997) Genes Dev 11, 3286-305.
  2. Wodarz, A. and Nusse, R. (1998) Annu Rev Cell Dev Biol 14, 59-88.
  3. Polakis, P. (1999) Curr Opin Genet Dev 9, 15-21.
  4. Brantjes, H. et al. (2002) Biol Chem 383, 255-61.
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Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    U.S. Patent No. 7,429,487, foreign equivalents, and child patents deriving therefrom.
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    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #8655

    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit

    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb #2203红色）和 CD4 (RM4-5) Rat mAb (redFluor™ 710 Conjugate) #75508（蓝色），对野生型（左图）Tcf7GFP flox（右图；Jax 品系 030909）小鼠的固定冷冻淋巴结进行共聚焦免疫荧光分析。在 Tcf7 外显子 2 周围插入 EGFP 干扰了长同工型表达，但不干扰短同工型表达。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image

    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（左图）作为对照，使用 LEF1 (C12A5) Rabbit mAb（右图）和共染色的 CD3 (UCHT1) Mouse mAb (APC Conjugate) #19881 对人外周血单核细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 c-Myc (D84C12) Rabbit mAb #5605 对 Raji 细胞的裂解物 (1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:50 和 1:250 时的单一靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:50（蓝线）和 1:250（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from HT-29 untreated cells using Met (D1C2) XP® Rabbit mAb #8198 lane view (left) shows a single target band (as indicated) at 1:50 and 1:250 dilutions of primary antibody. 对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:50（蓝线）和 1:250（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image

    使用  c-Jun (60A8) Rabbit mAb #9165 对经过紫外线（100 mJ/cm2；恢复 2 小时）处理的 HeLa 细胞裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。

    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb，对来自 HT29、Colo201、Jurkat 和小鼠胸腺细胞的总细胞裂解物进行蛋白质印迹分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 LEF1 (C12A5) Rabbit mAb 对 HCT15 细胞、DLD1 细胞和小鼠胸腺细胞的总细胞裂解物进行蛋白质印迹分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 Cyclin D1 (92G2) Rabbit mAb 对 MCF7、L929 和 C6 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 CD44 (156-3C11) Mouse mAb，对 HeLa 和 PANC1 细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 MMP-7 (D4H5) XP® Rabbit mAb ，对小鼠小肠（MMP-7 阳性）、小鼠结肠（MMP-7 阴性）和大鼠前列腺（MMP-7 阳性）组织提取物进行蛋白质印迹分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 c-Myc (D84C12) Rabbit mAb Antibody, #5605 （上图）或β-actin (13E5) Rabbit mAb #4970（下图）对对照 HEK293 细胞（泳道 1）或 c-Myc 敲除型 HEK293 细胞（泳道2）提取物进行蛋白质印迹法分析。c-Myc 敲除型 HEK293 细胞中没有信号，这证实了该抗体对 c-Myc 的特异性。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO*，它可在酶催化的分解期间发光。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 Met (D1C2) XP® Rabbit mAb（上）或 β-Actin Antibody #4967（下），对来自 HT-29 细胞 (Met+)、SK-BR-3 细胞 (Met-) 和 T-47D 细胞 (Met-) 的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 c-Jun (60A8) Rabbit mAb #9165对对照型 HeLa 细胞 (lane 1) 或 c-Jun 敲除型 HeLa 细胞 (lane 2) 的提取物进行蛋白印迹分析。c-Jun 敲除型 HeLa 细胞中没有信号，这证实了该抗体对 c-Jun 的特异性。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人非霍奇金淋巴瘤组织进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 Cyclin D1 (92G2) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 CD44 (156-3C11) Mouse mAb，对人非霍奇金淋巴瘤进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 MMP-7 (D4H5) XP® Rabbit mAb， 对未转染的COS 细胞提取物或用小鼠 MMP-7 转染的COS 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 c-Myc (D84C12) Rabbit mAb 对转染空载或经 SignalSilence® c-Myc siRNA I #6341 转染的 Hela 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 Met (D1C2) XP® Rabbit mAb #8198 对对照 HeLa 细胞（泳道 1） 或 Met 敲除型 HeLa 细胞（泳道 2）的提取物进行蛋白质印迹分析。Met 敲除型 HeLa 细胞中没有信号，这证实了该抗体对 Met 的特异性。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 c-Jun (60A8) Rabbit mAb 对未经和已经 UV 处理的 NIH/3T3 和 SK-N-MC 细胞提取物进行进行蛋白质印迹分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    在对照肽（左图）或 TCF1/TCF7 Blocking Peptide #1007（右图）存在的情况下，使用 TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 Cyclin D1 (92G2) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 Apc (min/+) 小鼠肠道进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 CD44 (156-3C11) Mouse mAb，对人扁桃体进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    使用 MMP-7 (D4H5) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠小肠（阳性，左）和小鼠结肠（阴性，右）进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    使用 c-Myc (D84C12) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    在 Leica® Bond™ Rx 上使用 Met (D1C2) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠腺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    使用 c-Jun (60A8) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人类星形细胞瘤进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    使用 TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人扁桃体组织进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    使用 LEF1 (C12A5) Rabbit mAb（绿色）对 HCT-15 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝已用 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）进行标记。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    在对照肽（左）或 Cyclin D1 Blocking Peptide #1044（右）存在的情况下，使用 Cyclin D1 (92G2) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 33 Expand Image
    使用 CD44 (156-3C11) Mouse mAb（绿色）、DyLight™ 650 Phalloidin #12956（红色）和 DAPI #4083 （蓝色）对 PANC-1 细胞（左图，阳性）或 A2780 细胞（右图，阴性）进行共聚焦免疫荧光分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 34 Expand Image
    使用 c-Myc (D84C12) Rabbit mAb（绿色）对转染空载（左图）或经 SignalSilence® c-Myc siRNA I #6341 转染（右图）的 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝已用 DY-554 Phalloidin（红色）标记。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 35 Expand Image
    在 Leica® Bond™ Rx 上使用 Met (D1C2) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人非小细胞肺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 36 Expand Image
    使用 c-Jun (60A8) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人类结肠癌进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 37 Expand Image
    使用 TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb（绿色）对 DLD-1 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 Alexa Fluor®555 phalloidin（红色）进行标记。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 38 Expand Image

    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（左图）作为对照，使用 LEF1 (C12A5) Rabbit mAb（右图）和共染色的 CD3 (17A2) Rat mAb (APC Conjugate) #24265 对小鼠脾脏进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 39 Expand Image
    使用 Cyclin D1 (92G2) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 H1975 异种移植物进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 40 Expand Image
    使用 CD44 (156-3C11) Mouse mAb（绿色），对 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 Alexa Fluor®555 phalloidin（红色）进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 41 Expand Image
    使用 Met (D1C2) XP® Rabbit mAb，对石蜡包埋的人转移性肺癌进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 42 Expand Image
    使用 c-Jun (60A8) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人类卵巢癌进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 43 Expand Image
    使用 TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对 A20 细胞（蓝色）和 EL-4 细胞（绿色）进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 44 Expand Image
    使用 CD44 (156-3C11) Mouse mAb（实线）或浓度匹配的 Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415（虚线）对活性 LNCaP 细胞（蓝色，阴性）和 PANC-1 细胞（绿色，阳性）进行流式细胞分析。Anti-mouse IgG (H+L)，F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4408 作为二抗。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 45 Expand Image
    使用 Met (D1C2) XP® Rabbit mAb，对石蜡包埋的人肝细胞癌进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 46 Expand Image
    使用 CD44 (156-3C11) Mouse mAb（实线）或浓度匹配的 Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415（虚线）对固定和透化的 LNCaP 细胞（蓝色，阴性）和 PANC-1 细胞（绿色，阳性）进行流式细胞分析。Anti-mouse IgG (H+L)，F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4408 作为二抗。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 47 Expand Image
    使用 Met (D1C2) XP® Rabbit mAb，对石蜡包埋的人乳头状肾细胞癌进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 48 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对小鼠胸腺细胞的交联染色质和 TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀分析。使用 SimpleChIP® Mouse LEF1 Upstream Primers #80993 和 SimpleChIP® Mouse MYT-1 Promoter Primers #8985 进行实时 PCR 来对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 49 Expand Image
    使用 Met (D1C2) XP® Rabbit mAb，对石蜡包埋的细胞沉淀物 MKN-45（左）和 T-47D（右）进行免疫组织化学分析。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 50 Expand Image
    使用 c-Jun (60A8) Rabbit mAb（绿色）对 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 Alexa Fluor®555 phalloidin（红色）进行标记。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 51 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）作为对照，使用 c-Jun (60A8) Rabbit mAb（实线）对 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 52 Expand Image
    使用 Met (D1C2) XP® Rabbit mAb（绿色），对 HT-29 细胞和 T-47D 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin（红色）标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 53 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005，对饥饿过夜后以β-NGF #5221 (50ng/ml) 处理 2 小时的 PC-12 细胞中提取的交联染色质，在加入 c-Jun (60A8) Rabbit mAb 后进行染色质免疫沉淀。DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795。图片中显示 Dclk1 内结合，而 Dclk1 是已知的 c-Jun 靶标基因（请参阅含有 ChIP-qPCR 数据的附图）。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 54 Expand Image
    使用 Met (D1C2) XP®3900 Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #（虚线）对固定和透化的 Ramos 细胞（蓝色，阴性）和 MKN-45 细胞（绿色，阳性）进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 55 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005，对饥饿过夜后以β-NGF #5221 (50ng/ml) 处理 2 小时的 PC-12 细胞中提取的交联染色质，在加入 c-Jun (60A8) Rabbit mAb 后进行染色质免疫沉淀。DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795。结果图显示在染色体2（上图）内的结合，包括 c-Jun 的已知靶标基因 Dclk1（下图）（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。
    Wnt/β-Catenin Activated Targets Antibody Sampler Kit: Image 56 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对饥饿过夜后以 β-NGF #5221 (50ng/ml) 处理 2 小时的 PC-12 细胞中提取的交联染色质，在加入 c-Jun (60A8) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Rat CCRN4L Promoter Primers #7983、rat DCLK1 promoter primers 和 SimpleChIP® Rat GAPDH Promoter Primers #7964，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
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