Revision 1

#74798Store at -20C

1 个试剂盒

(8 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
PSD95 (D74D3) XP® Rabbit mAb 3409 20 µl 95 kDa Rabbit IgG
Synaptophysin (D8F6H) XP® Rabbit mAb 36406 20 µl 38 kDa Rabbit IgG
Bassoon (D63B6) Rabbit mAb 6897 20 µl 420 kDa Rabbit IgG
Complexin-1/2 (D8A6E) Rabbit mAb 28070 20 µl 14-16 kDa Rabbit IgG
Synaptotagmin-1 (D33B7) Rabbit mAb 14558 20 µl 60 kDa Rabbit IgG
SHANK3 (D5K6R) Rabbit mAb 64555 20 µl 220 kDa Rabbit IgG
Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb 5297 20 µl 77 kDa Rabbit IgG
SynGAP (D78B11) Rabbit mAb 5540 20 µl 140 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit provides an economical means of detecting presynaptic and postsynaptic proteins by western blot. This kit includes enough primary antibodies to perform at least two western blot experiments with each primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/mL BSA, 50% glycerol, and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Synaptophysin (SYP) is a neuronal synaptic vesicle glycoprotein that is expressed in neuroendocrine cells and neoplasms (1). Synapsin-1 is a neuronal phospho-protein localized to presynaptic terminals. Synapsin-1 plays an important role in synapse formation, neurotransmitter regulation, and regulation of synaptic vesicle fusion and trafficking (2,3). Synaptotagmin-1 (SYT1) is an integral membrane protein found in synaptic vesicles thought to play a role in vesicle trafficking and exocytosis (4). Complexin isoforms 1 and 2 are small synaptic proteins that bind to SNARE complexes, responsible for regulating exocytosis and synaptic vesicle fusion (5). SynGAP is a synaptic GTPase-activating protein selectively expressed in the brain and found at higher concentrations specifically at excitatory synapses in the mammalian forebrain. SynGAP interacts with the PDZ domains of PSD95, a postsynaptic scaffolding protein that couples SynGAP to NMDA receptors (6). PSD95 is involved in the assembly and function of the postsynaptic density (PSD) complex (7,8). SHANK proteins act as scaffolds at the neuronal PSD (9), where they play a critical role in PSD assembly of excitatory synapses during development (10). Bassoon (BSN) is a scaffolding protein component of the synaptic ribbon and of the cytomatrix at the active zones of both excitatory and inhibitory synapses with a presumptive role in orchestrating events of the synaptic vesicle cycle (11-13). Together, these proteins can be used to measure presynaptic and postsynaptic proteins and synaptic development under normal and disease conditions.

  1. Wiedenmann, B. et al. (1986) Proc Natl Acad Sci U S A 83, 3500-4.
  2. Mirza, F.J. and Zahid, S. (2018) Neurosci Bull 34, 349-358.
  3. Takei, Y. et al. (1995) J Cell Biol 131, 1789-800.
  4. Fukuda, M. and Mikoshiba, K. (2001) Biochem Biophys Res Commun 281, 1226-33.
  5. Chang, S. et al. (2015) J Neurosci 35, 8272-90.
  6. Kim, J.H. et al. (1998) Neuron 20, 683-91.
  7. Cao, J. et al. (2005) J Cell Biol 168, 117-26.
  8. Chetkovich, D.M. et al. (2002) J Neurosci 22, 6415-25.
  9. Grabrucker, A.M. et al. (2011) Trends Cell Biol 21, 594-603.
  10. Boeckers, T.M. et al. (1999) J Neurosci 19, 6506-18.
  11. Winter, C. et al. (1999) Genomics 57, 389-97.
  12. Hallermann, S. et al. (2010) Neuron 68, 710-23.
  13. Frank, T. et al. (2010) Neuron 68, 724-38.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #74798

    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit

    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from mouse brain using Synaptophysin (D8F6H) XP® Rabbit mAb #36406. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from CAD cells using Synapsin-1 (D12G5) XP Rabbit mAb #5297. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 Synaptotagmin-1 (D33B7) Rabbit mAb 对小鼠和大鼠脑细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 Complexin-1/2 (D8A6E) Rabbit mAb（上图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对 Neuro-2a、NIH/3T3 和小鼠脑的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 PSD95 (D74D3) XP® Rabbit mAb 对小鼠和大鼠脑细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 Synaptophysin (D8F6H) XP® Rabbit mAb（上图）和 B-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对小鼠和大鼠组织的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb 对 CAD 细胞和新生小鼠脑组织提取物进行蛋白质印迹分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 SynGAP (D78B11) Rabbit mAb 对小鼠和大鼠脑组织提取物进行蛋白质印迹分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 SHANK3 (D5K6R) Rabbit mAb（上图）和 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487（下图）对小鼠新生儿脑细胞、C2C12 细胞和大鼠胎脑细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 Bassoon (D63B6) Rabbit mAb 对来自小鼠脑组织和大鼠脑组织的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 Synaptotagmin-1 (D33B7) Rabbit mAb（绿色）对小鼠视网膜组织进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 Complexin-1/2 (D8A6E) Rabbit mAb（上图）和 Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb #2278（下图）对转染空载 (-) 或经构建表达和 Myc 标记的全长人 complexin-1 (hCPLX-1-Myc; +) 或 complexin-2 (hCPLX-2-Myc; +) 转染 的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    在有对照肽（左图）或抗原特异性肽（右图）的情况下，使用 PSD95 (D74D3) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的大鼠视网膜细胞进行免疫组织化学分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 Synaptophysin (D8F6H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 Neuro-2a 细胞沉淀物（左图，阳性）或 C2C12 细胞沉淀物（右图，阴性）进行免疫组织化学分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人小脑组织进行免疫组织化学分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 SHANK3 (D5K6R) 兔单克隆抗体（上图）和 β-肌动蛋白 (D6A8) 兔单克隆抗体 #8457（下图）对用出生后 14 天的野生型和 SHANK3 -/- 小鼠的细胞制备的纹状体突触体提取物进行蛋白质印迹分析。野生型和 SHANK3 -/- 突触体裂解物由 Tobias Kaiser 和 Guoping Feng 博士（马萨诸塞州剑桥麻省理工学院）惠赠。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 Bassoon (D63B6) Rabbit mAb（绿色）对正常大鼠小脑、海马和视网膜进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    Simple Western™ analysis of lysates (0.5 mg/mL) from IMR-32 cells using Synaptotagmin-1 (D33B7) Rabbit mAb #14558. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    对 Neuro-2A 细胞提取物中的 complexin-1/2 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 Complexin-1/2 (D8A6E) Rabbit mAb。使用 Complexin-1/2 (D8A6E) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 Synaptophysin (D8F6H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠小脑细胞进行免疫组织化学分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠脑皮质进行免疫组织化学分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用 SHANK3 (D5K6R) Rabbit mAb（绿色）和 GFAP (GA5) Mouse mAb #3670（红色）对大鼠小脑（左图），海马（中图）和纹状体（右图）进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 Complexin-1/2 (D8A6E) Rabbit mAb（绿色）对 Neuro-2a（左图）和 NIH/3T3（右图）细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 Synaptophysin (D8F6H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠结肠细胞进行免疫组织化学分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    使用 Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的大鼠视网膜进行免疫组织化学分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    使用 Synaptophysin (D8F6H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人非小细胞肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    使用 Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb（绿色）和 β3-Tubulin (TU-20) Mouse mAb #4466（红色），对小鼠脑进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    使用 Synaptophysin (D8F6H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人子宫内膜腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    使用 Synaptophysin (D8F6H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠胰腺细胞进行免疫组织化学分析。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    使用 Synaptophysin (D8F6H) XP® Rabbit mAb（绿色）、Neurofilament-L (DA2) Mouse mAb #2835（黄色）和 Lamin A/C (4C11) Mouse mAb #4777（红色）对小鼠视网膜进行共聚焦免疫荧光分析。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）封片。
    Synaptic Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    使用 Synaptophysin (D8F6H) XP® Rabbit mAb（绿色）、Neurofilament-L (DA2) Mouse mAb #2835（黄色）和 Lamin A/C (4C11) Mouse #4777（红色）对小鼠脑进行共聚焦免疫荧光分析。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）封片。
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