Revision 1

#64097Store at -20C

1 个试剂盒

(8 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Phospho-Na,K-ATPase α1 (Tyr10) (E1Y9C) Rabbit mAb 13566 20 µl 100 kDa Rabbit IgG
Pan-Cadherin (28E12) Rabbit mAb 4073 20 µl 130-150 kDa Rabbit IgG
E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 3195 20 µl 135 kDa Rabbit IgG
4F2hc/SLC3A2 (D3F9D) XP® Rabbit mAb 47213 20 µl 75-120 kDa Rabbit IgG
Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 3267 20 µl 21, 24 kDa Rabbit IgG
N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 13116 20 µl 140 kDa Rabbit IgG
ENPP1 (D37B7) Rabbit mAb 5342 20 µl 140 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 
Na,K-ATPase α1 (D4Y7E) Rabbit mAb 23565 20 µl 100 kDa Rabbit IgG

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit provides an economical means of detecting plasma membrane markers in various cell types. The kit includes enough antibodies to perform two western blot experiments with each primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibodies.

Background

The Na,K-ATPase is an integral membrane heterodimer belonging to the P-type ATPase family. Phosphorylation of Na,K-ATPase at Tyr10 has been implicated in the regulation of enzyme activity in response to hormones and neurotransmitters (1). Cadherins are a superfamily of transmembrane glycoproteins that contain cadherin repeats of approximately 100 residues in their extracellular domain. Cadherins mediate calcium-dependent cell-cell adhesion and play critical roles in normal tissue development. The classic cadherin subfamily includes N-, P-, R-, B-, and E-cadherins, as well as about ten other members that are found in adherens junctions, a cellular structure near the apical surface of polarized epithelial cells (2). 4F2hc is a transmembrane protein that belongs to the solute carrier family. 4F2hc forms heterodimeric complexes with various amino acid transporters, such as LAT1 and LAT2, and regulates uptake of amino acids (3). The 21-24 kDa integral proteins, caveolins, are the principal structural components of the cholesterol/sphingolipid-enriched plasma membrane microdomain caveolae. Three members of the caveolin family (caveolin-1, -2, and -3) have been identified with different tissue distributions (4). Ectonucleotide pyrophosphatase-phosphodiesterase 1 (ENPP1) is a single-pass, type II transmembrane protein primarily involved in ATP hydrolysis at the plasma membrane. ENPP1 plays important roles in bone mineralization and soft tissue calcification (5).

  1. Therien, A.G. and Blostein, R. (2000) Am J Physiol Cell Physiol 279, C541-66.
  2. Wheelock, M.J. and Johnson, K.R. (2003) Annu Rev Cell Dev Biol 19, 207-35.
  3. Kanai, Y. et al. (1998) J Biol Chem 273, 23629-32.
  4. Okamoto, T. et al. (1998) J Biol Chem 273, 5419-22.
  5. Harmey, D. et al. (2004) Am J Pathol 164, 1199-209.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    U.S. Patent No. 5,675,063.
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    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #64097

    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit

    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb #3195 对 MCF-7 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的单一靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    对使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb（左图，红色）标记并使用 DyLight™ 488 Phalloidin #12935（右图，绿色）和 DAPI #4083（右图，蓝色）共标记的固定的冷冻小鼠脾脏组织进行共聚焦免疫荧光分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    对使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb（左图，红色）标记并使用 DyLight™ 488 Phalloidin #12935（右图，绿色）和 DAPI #4083（右图，蓝色）共标记的固定的冷冻小鼠肾脏组织进行共聚焦免疫荧光分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    对使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb（左图，红色）标记并使用 DyLight™ 488 Phalloidin #12935（右图，绿色）和 DAPI #4083（右图，蓝色）共标记的固定的冷冻小鼠骨骼肌组织进行共聚焦免疫荧光分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对 A172 和 MCF7 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 Phospho-Na,K-ATPase α1 (Tyr10) (E1Y9C) Rabbit mAb (上图) 或 Na,K-ATPase Antibody#3010 (下图)，对未经处理 (-) 或经 Human Epidermal Growth Factor (hEGF) #8916 (100 ng/ml, 2分钟; +) 处理的 A-431 细胞以及未经处理 (-) 或过钒酸钠 (1 mM, 15分钟; +) 处理的 Hela 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 Na,K-ATPase α1 (D4Y7E) Rabbit mAb（上）或 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487（下） 对来自 SK-MEL-28 细胞、SNB19 细胞和 A-204 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    在 Leica BOND Rx 上使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人前列腺腺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 对不同细胞类型提取物进行蛋白质印迹分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 Pan-Cadherin (28E12) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 4F2hc/SLC3A2 (D3F9D) XP® Rabbit mAb（上图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对来自各种细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 ENPP1 (D37B7) Rabbit mAb 对 Hep G2 和 MDA-MB-231 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    在 Leica® BOND™ Rx 上使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人非霍奇金氏淋巴瘤进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 Na,K-ATPase α1 (D4Y7E) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 SK-MEL-28（左）细胞沉淀物和 A-204（右）细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    在 Leica BOND Rx 上使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳头状甲状腺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb #3267（上图）或 β-actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对对照 HeLa 细胞（泳道 1）或 Caveolin-1 敲除型 HeLa 细胞（泳道 2）的提取物进行蛋白质印迹分析。Caveolin-1 敲除型 HeLa 细胞中没有信号，这证实了抗体对Caveolin-1 的特异性。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 4F2hc/SLC3A2 (D3F9D) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    在 Leica® BOND™ Rx 上使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人卵巢颗粒细胞瘤进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    在对照肽（左）或抗原特异性肽（右）存在的情况下，使用 Na,K-ATPase α1 (D4Y7E) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人阑尾进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 对 HeLa 细胞中提取的 caveolin-1 进行免疫沉淀，之后再使用相同的抗体进行蛋白质印迹分析。泳道 1 是 5% 输入对照。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 4F2hc/SLC3A2 (D3F9D) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌组织进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    在 Leica® BOND™ Rx 上使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人胃癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    使用 Na,K-ATPase α1 (D4Y7E) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人前列腺癌进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人淋巴结转移性腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人类结肠癌进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    使用 4F2hc/SLC3A2 (D3F9D) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人卵巢癌组织进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠细胞进行免疫组织化学分析。注意肠肌丛的染色。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠前列腺进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人淋巴瘤进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 33 Expand Image
    使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人卵巢癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 34 Expand Image
    使用 Na,K-ATPase α1 (D4Y7E) Rabbit mAb（绿色）对 SK-MEL-28 细胞（左）、SNB19 细胞（中）或 A-204 细胞（右）进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 35 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠胰腺进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 36 Expand Image
    在对照肽（左图）或抗原特异性肽（右图）存在的情况下，使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠肺进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 37 Expand Image
    使用 4F2hc/SLC3A2 (D3F9D) XP® Rabbit mAb（绿色）对 Hela 细胞（左图，高表达）或 SH-SY5Y 细胞（右图，低表达）进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 38 Expand Image
    使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 A172（阳性，左图）和 MCF7（阴性，右图）细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 39 Expand Image
    使用与同型对照物作对比的 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb（绿色，左图）对照（右图），对 MCF7 细胞进行共聚焦免疫荧光图像分析。蓝色伪彩 = DRAQ5®（DNA 荧光染料）。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 40 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠小肠进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 41 Expand Image
    使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb（绿色）对 C2C12 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记（红色）。蓝色伪彩 = DRAQ5®（DNA 荧光染料）。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 42 Expand Image
    使用 4F2hc/SLC3A2 (D3F9D) XP® Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对 SH-SY5Y 细胞（蓝色）和 HeLa 细胞（绿色）进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 43 Expand Image
    使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb（绿色）对 A172（阳性，左图）和 MCF7（阴性，右图）细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 44 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠肺细胞进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 45 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）作为对照，使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb（实线）对 Hela 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 46 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠胃进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 47 Expand Image
    在对照肽（左图）或 E-Cadherin Blocking Peptide #1050（右图）存在的情况下，使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Plasma Membrane Marker Antibody Sampler Kit: Image 48 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对 Jurkat 细胞（蓝色，阴性）和 MCF7 细胞（绿色，阳性）进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')₂ Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
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