Revision 1

#9779Store at -20C

1 个试剂盒

(5 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Pim-1 (C93F2) Rabbit mAb 3247 20 µl 34 kDa Rabbit IgG
Pim-2 (D1D2) Rabbit mAb 4730 20 µl 40, 38, 34 kDa Rabbit 
Pim-3 (D17C9) Rabbit mAb 4165 20 µl 35 kDa Rabbit IgG
Phospho-Bad (Ser112) (40A9) Rabbit mAb 5284 20 µl 23 kDa Rabbit IgG
Bad (D24A9) Rabbit mAb 9239 20 µl 23 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Pim Kinase Antibody Sampler Kit provides an economical means to detect all three Pim kinases along with Bad and Phospho-Bad (Ser112). The kit contains enough primary and secondary antibody to perform two western blot experiments.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Pim proteins (Pim-1, Pim-2 and Pim-3) are oncogene-encoded serine/threonine kinases (1). Pim-1, a serine/threonine kinase highly expressed in hematopoietic cells, plays a critical role in the transduction of mitogenic signals and is rapidly induced by a variety of growth factors and cytokines (1-4). Pim-1 cooperates with c-Myc in lymphoid cell transformation and protects cells from growth factor withdrawal and genotoxic stress-induced apoptosis (5,6). Pim-1 also enhances the transcriptional activity of c-Myb through direct phosphorylation within the c-Myb DNA binding domain as well as phosphorylation of the transcriptional coactivator p100 (7,8). Hypermutations of the Pim-1 gene are found in B-cell diffuse large cell lymphomas (9). Phosphorylation of Pim-1 at Tyr218 by Etk occurs following IL-6 stimulation and correlates with an increase in Pim-1 activity (10). Various Pim substrates have been identified; Bad is phosphorylated by both Pim-1 and Pim-2 at Ser112 and this phosphorylation reverses Bad-induced cell apoptosis (11,12).
The corresponding pim-1 gene encodes a pair of proteins through use of different translation initiation sites. Both larger 44 kDa (Pim-1L) and smaller 33 kDa (Pim-1S) proteins are active kinases, but differ in stability (13).

  1. Mikkers, H. et al. (2004) Mol Cell Biol 24, 6104-15.
  2. Selten, G. et al. (1986) Cell 46, 603-11.
  3. Meeker, T.C. et al. (1987) J Cell Biochem 35, 105-12.
  4. Dautry, F. et al. (1988) J Biol Chem 263, 17615-20.
  5. Möröy, T. et al. (1993) Proc Natl Acad Sci USA 90, 10734-8.
  6. Lilly, M. and Kraft, A. (1997) Cancer Res 57, 5348-55.
  7. Leverson, J.D. et al. (1998) Mol Cell 2, 417-25.
  8. Winn, L.M. et al. (2003) Cell Cycle 2, 258-62.
  9. Pasqualucci, L. et al. (2001) Nature 412, 341-6.
  10. Kim, O. et al. (2004) Oncogene 23, 1838-44.
  11. Aho, T.L. et al. (2004) FEBS Lett 571, 43-9.
  12. Yan, B. et al. (2003) J Biol Chem 278, 45358-67.
  13. Saris, C.J. et al. (1991) EMBO J 10, 655-64.

Background References

    Trademarks and Patents

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    Revision 1
    #9779

    Pim Kinase Antibody Sampler Kit

    Pim Kinase Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 Phospho-Bad (Ser112) (40A9) Rabbit mAb #5284 对经过 TPA(200 nM,20 分钟)处理的血清饥饿 COS 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的单一靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Pim Kinase Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 Bad (D24A9) Rabbit mAb #9239 对 OVCAR8 细胞的裂解物 (1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Pim Kinase Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 Pim-1 (C93F2) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Pim Kinase Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 Pim-3 (D17C9) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Pim Kinase Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 Pim-2 (D1D2) Rabbit mAb 对 K-562、Raji 和 KARPAS-620 细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Pim Kinase Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 Phospho-Bad (Ser112) (40A9) Rabbit mAb(上)或 Bad Antibody #9292(下),对未处理或经 TPA 处理的 COS 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Pim Kinase Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    Pim Kinase Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 Bad (D24A9) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Pim Kinase Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 Pim-1 (C93F2) Rabbit mAb 对重组 Pim-1、-2 和 -3 进行蛋白质印迹分析。
    Pim Kinase Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 Pim-3 (D17C9) Rabbit mAb 对重组 Pim-1、2 和 3 进行蛋白质印迹分析。
    Pim Kinase Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 Pim-2 (D1D2) Rabbit mAb 对重组 Pim-1、Pim-2 和 Pim-3 激酶进行蛋白质印迹分析。
    Pim Kinase Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 Phospho-Bad (Ser 112) (40A9) Rabbit mAb,对未处理(左)或经 λ 磷酸酶处理(右)的石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    Pim Kinase Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 Pim-3 (D17C9) Rabbit mAb 对未转染 (-) 或转染小鼠 Pim-3 表达载体 (+) 的 COS-7 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Pim Kinase Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 Phospho-Bad (Ser112) (40A9) Rabbit mAb,对未处理(左)或经 TPA 处理(右)且显示诱导胞质染色的石蜡包埋的 COS 细胞进行免疫组织化学分析。
    Pim Kinase Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用经对照肽(左)或 Phospho-Bad (Ser 112) Blocking Peptide (IHC Specific) #1026(右)预孵育的 Phospho-Bad (Ser 112) (40A9) Rabbit Monoclonal Antibody,对石蜡包埋的人前列腺癌进行免疫组织化学分析。
    Pim Kinase Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 Phospho-Bad (Ser112) (40A9) Rabbit mAb,对石蜡包埋的非霍奇金淋巴瘤细胞进行免疫组织化学分析。
    Pim Kinase Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 Phospho-Bad (Ser112) (40A9) Rabbit mAb,对未处理(蓝色)或经 TPA/Calyculin A 处理(绿色)的 COS 细胞进行流式细胞分析。