Revision 1

#83163Store at -20C

1 个试剂盒

(9 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
ASC/TMS1 (D2W8U) Rabbit mAb 67824 20 µl 22 kDa Rabbit IgG
HS1 (D5A9) XP® Rabbit mAb 3892 20 µl 80 kDa Rabbit IgG
Ki-67 (D3B5) Rabbit mAb 9129 20 µl Rabbit IgG
Axl (C89E7) Rabbit mAb 8661 20 µl 138 kDa Rabbit IgG
Hydroxy-HIF-1α (Pro564) (D43B5) XP® Rabbit mAb 3434 20 µl 120 kDa Rabbit IgG
Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 72604 20 µl 97, 113 kDa Rabbit IgG
Phospho-Stat2 (Tyr690) (D3P2P) Rabbit mAb 88410 20 µl 97, 113 kDa Rabbit IgG
Lamin A/C (4C11) Mouse mAb 4777 20 µl 74 (Lamin A), 63 (Lamin C) kDa Mouse IgG2a
IQGAP1 (D8K4X) XP® Rabbit mAb 20648 20 µl 195 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit provides an economical means of detecting proteins identified as markers of microglial activity corresponding to proliferation, neurodegeneration, interferon and LPS-relation by western blot and/or immunofluorescence.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Distinct microglial activation states have been identified using RNA-seq data from a vast array of neurological disease and aging models. These activation states have been categorized into modules corresponding to proliferation, neurodegeneration, interferon-relation, LPS-relation, and many others (1). Previous work identifying markers of specific brain cell types using RNA-seq has shown HS1 and ASC/TMS1 to be useful and specific tools to study microglia (2). HS1 is a protein kinase substrate that is expressed only in tissues and cells of hematopoietic origin (3) and ASC/TMS1 has been found to be a critical component of inflammatory signaling where it associates with and activates caspase-1 in response to pro-inflammatory signals (4).
Ki-67 is a nuclear nonhistone protein (5) universally expressed among proliferating cells and absent in quiescent cells (6). Axl is a receptor tyrosine kinase that binds Gas6, stimulating regulatory effects on microglial phagocytic response to inflammatory stimuli (7). Hypoxia inducible factor-1 (HIF-1α) is a transcription factor responsible for adaptation to low oxygen environments whose downstream effects have been shown in a number of neurodegenerative diseases. Under normoxic conditions, HIF-1α is proline hydroxylated leading to ubiquitin mediated degradation (8). Stat2 is critical to the transcriptional responses induced by type I interferons, IFN-alpha/beta (9,10). In response to IFN-alpha/beta, Stat2 is activated by phosphorylation at site Tyr690 through associations with receptor-bound Jak kinases (11). Lamins are nuclear membrane structural components important for maintaining normal cell functions. Lamin A/C is cleaved by caspase-6 and serves as a marker for caspase-6 activation. The cleavage of lamins results in nuclear dysregulation and cell death (12,13). IQGAP1 is ubiquitously expressed and has been found to interact with APC (14) and the CLIP170 complex in response to small GTPases, promoting cell polarization and migration (15).

  1. Friedman, B.A. et al. (2018) Cell Rep 22, 832-47.
  2. Zhang, Y. et al. (2014) J Neurosci 34, 11929-47.
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  5. Gerdes, J. et al. (1983) Int J Cancer 31, 13-20.
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  8. Zhang, Z. et al. (2011) Curr Med Chem 18, 4335-43.
  9. Fu, X.Y. et al. (1992) Proc Natl Acad Sci U S A 89, 7840-3.
  10. Ihle, J.N. (2001) Curr Opin Cell Biol 13, 211-7.
  11. Improta, T. et al. (1994) Proc Natl Acad Sci U S A 91, 4776-80.
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  13. Rao, L. et al. (1996) J Cell Biol 135, 1441-55.
  14. Watanabe, T. et al. (2004) Dev Cell 7, 871-83.
  15. Fukata, M. et al. (2002) Cell 109, 873-85.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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    Revision 1
    #83163

    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit

    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 Lamin A/C (4C11) Mouse mAb(实线)或浓度匹配的 Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415(虚线)对 Daudi 细胞(蓝色)和 MJ 细胞(绿色)进行流式细胞分析。Anti-mouse IgG (H+L),F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4408 作为二抗。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)作为对照,使用 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb(实线)对 K-562 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb #8661 对 HeLa 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的单一靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 IQGAP1 (D8K4X) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 Hydroxy-HIF-1α (Pro564) (D43B5) XP® Rabbit mAb(上图)或总 HIF-1α Antibody #3716(下图),对用 10 μM 的 MG132(累积羟基化 HIF-1α )或 10 µM MG132 和 1 mM DMOG(累积非羟基化 HIF-1α)处理的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 HS1 (D5A9) XP® Rabbit mAb 对 Baf3、32D 和小鼠脾脏的细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 Lamin A/C (4C11) Mouse mAb #4777(上图)或 α-actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487(下图)对对照 HeLa 细胞(泳道 1)或 LMNA 编码基因出现明显框内截短突变的 HeLa 细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白印迹分析。突变 HeLa 细胞中 LMNA 分子量的变化与框内缺失一致。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 ASC/TMS1 (D2W8U) Rabbit mAb(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对来自 J774A.1 细胞和 Raw 264.7 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。KARPAS细胞系来源:剑桥大学的 Abraham Karpas 博士。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经过 Human Interferon-γ (hIFN-γ) #8927(10nM,30 分钟)处理的 U266 细胞和 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在 GAS5 基因内结合。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb #8661(上图)或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对未经处理 (-) 或 Axl 敲除型 (+) HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 Phospho-Stat2 (Tyr690) (D3P2P) Rabbit mAb(上图)和总 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb #72604(下图),对未经处理 (-) 或已经 Human Interferon-α1 (hIFN-α1) #8927 (10 ng/ml; +) 处理的血清饥饿 U266 和 A-431 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 Ki-67 (D3B5) Rabbit mAb(绿色)对 P21 小鼠脑的脑室区细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝用 DyLight 554 phalloidin #13054(红色)标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    乳腺癌:

    使用 IQGAP1 (D8K4X) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人浸润性乳头状癌细胞进行免疫组织化学分析。

    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 Hydroxy-HIF-1α (Pro564) (D43B5) XP® Rabbit mAb(绿色),对用 10 μM MG132(左)或 10 μM MG132 和 1 mM DMOG(右)处理的 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝已用 DY-554 phalloidin(红色)标记。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 HS1 (D5A9) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠脾脏进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 Lamin A/C (4C11) Mouse mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    对 J774A.1 细胞提取物 ASC/TMS1 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 ASC (D2W8U) Rabbit mAb。使用 ASC/TMS1 (D2W8U) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹法分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    对 KARPAS-299 细胞提取物中的 Stat2 进行免疫沉淀。泳道 1 为10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb。使用 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹。KARPAS细胞系来源:剑桥大学的 Abraham Karpas 博士。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经过 Human Interferon-γ (hIFN-γ) #8927(10nM,30 分钟)处理的 U266 细胞和 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在染色体 1(上图)内的结合,包括 GAS5 基因(下图)。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb(上)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用 Phospho-Stat2 (Tyr690) (D3P2P) Rabbit mAb(绿色)和 β-actin (8H10D10) Mouse mAb #3700(红色),对血清饥饿(左图)或经 IFNα 处理(1000 U/ml,30 分钟;右图)的 A-431 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 Ki-67 (D3B5) Rabbit mAb(绿色)对 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 IQGAP1 (D8K4X) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 SK-MEL-28(左)和 LNCaP(右)细胞团进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    使用 HS1 (D5A9) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 LL2 同源肿瘤进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    使用 Lamin A/C (4C11) Mouse mAb 对未经处理或经 Cycloheximide 处理(CHX,10 μg/ml,过夜)后再经 TNF-α #8902处理(20 ng/ml,4 小时)的 THP-1 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    使用 ASC/TMS1 (D2W8U) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 J774A.1 细胞沉淀物(左图,阳性)或 RAW 264.7 细胞沉淀物(右图,阴性)进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    使用 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb(绿色),对血清饥饿(左图)或经 IFNα 处理(#1000,30 ng/mL,分钟;右图)的 A-431 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经过 Human Interferon-α1 (hIFN-α1) #8927(10nM,30min)处理的 U266 细胞和 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN 分析。使用人 SIN3A 启动子引物和人 ITM2A 上游引物通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。注意浸润细胞的染色。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    使用 Phospho-Stat2 (Tyr690) (D3P2P) Rabbit mAb 对未经处理(蓝色)或已经 IFN-α(绿色)处理的 U266 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 fragment (Alexa Fluor 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 33 Expand Image
    使用 Ki-67 (D3B5) Rabbit mAb 和 Propidium Iodide (PI)/RNase Staining Solution #4087 对 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 34 Expand Image
    使用 IQGAP1 (D8K4X) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 35 Expand Image
    Confocal immunofluorescent analysis of fixed frozen mouse cortex from wild-type (left) or an amyloid mouse model of Alzheimer's disease (right) using HS1 (D5A9) XP® Rabbit mAb (green). After blocking free secondary antibody binding sites with Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, the tissue was then labeled using β-Amyloid (D54D2) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjugate) #35363 (red) and ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961 (blue).
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 36 Expand Image
    使用 Lamin A/C (4C11) Mouse mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 37 Expand Image
    使用 ASC/TMS1 (D2W8U) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠前胃组织进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 38 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肾细胞癌进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 39 Expand Image
    使用 IQGAP1 (D8K4X) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人卵巢癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 40 Expand Image
    对过表达突变型人 APP695 的小鼠 Tg2576 脑细胞进行共聚焦免疫荧光分析。首先用 HS1 (D5A9) XP® Rabbit mAb(绿色)和 APP/β-Amyloid (NAB228) Mouse mAb #2450(黄色)标记切片。用 Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415 封闭游离二抗结合位点之后,切片用 GFAP (GA5) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate) #3657(红色)孵育。胞核用 Hoechst 33342 #4082(蓝色)标记。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 41 Expand Image
    使用 Lamin A/C (4C11) Mouse mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 42 Expand Image
    使用 ASC/TMS1 (D2W8U) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠脑组织进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 43 Expand Image
    使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒(磁珠法) #9005 对经人源干扰素-α (IFN-α) #9906 (10nM) 处理 30 分钟的 U266 细胞的交联染色质和 Stat2 (D9J7L) 兔单克隆抗体进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 Stat2 的已知靶基因 USP18 内结合(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。欲知其他 ChIP-seq 情况,请下载产品说明书。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 44 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人 B 细胞非霍奇金淋巴瘤进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 45 Expand Image
    使用 IQGAP1 (D8K4X) XP® Rabbit mAb 对 A549(左)和 Hep G2(右)细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 46 Expand Image
    使用 HS1 (D5A9) XP® Rabbit mAb(绿色)对 32D 细胞(左图)和 C2C12 细胞(右图)进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 47 Expand Image
    使用 Lamin A/C (4C11) Mouse mAb (绿色)和 MAP2 Antibody #4542 (红色)对正常大鼠脑细胞进行免疫荧光分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 48 Expand Image
    与浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(右图)比较,使用 ASC/TMS1 (D2W8U) Rabbit mAb(左图)对石蜡包埋的小鼠结肠组织进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 49 Expand Image
    使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒(磁珠法) #9005 对经人源干扰素-α (IFN-α) #9906 (10nM) 处理 30 分钟的 U266 细胞的交联染色质和 Stat2 (D9J7L) 兔单克隆抗体进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 22(上图)内的结合,包括 Stat2 的已知靶标基因 USP18(下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 50 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人卵巢浆液性癌进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 51 Expand Image
    Flow cytometric analysis of NIH/3T3 cells (blue, negative) and 32D clone 3 cells (green, positive) using HS1 (D5A9) XP® Rabbit mAb (solid lines) or concentration-matched Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (dashed lines). Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 52 Expand Image
    使用 Lamin A/C (4C11) Mouse mAb (绿色)对 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 53 Expand Image
    使用 ASC/TMS1 (D2W8U) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠胸腺组织进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 54 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对经 Human Interferon-α (IFN-α) #9906 (100 ng/ml) 处理 30 分钟的 U266 细胞中提取的交联染色质,在加入Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729​ 后,进行染色质免疫沉淀。使用 human USP18 promoter primers、SimpleChIP® Human WARS Intron 1 Primers #30101 以及 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 55 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的转移性肺癌进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 56 Expand Image
    使用 Lamin A/C (4C11) Mouse mAb(实线)或浓度匹配的 Mouse (G3A1) mAb IgG Isotype Control #5415(虚线),对 HeLa 细胞(绿色)进行流式细胞分析。Anti-mouse IgG (H+L),F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4408 作为二抗。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 57 Expand Image
    使用 ASC/TMS1 (D2W8U) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠小肠组织进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 58 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的细胞沉淀物 NCI-H1299(左)或 Jurkat(右)进行免疫组织化学分析。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 59 Expand Image
    使用 ASC/TMS1 (D2W8U) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 Renca 同基因肿瘤(左上图)、4T1 同基因乳腺肿瘤(右上图)、Renca 细胞沉淀物(左下图)和 4T1 细胞沉淀物(右下图)进行免疫组织化学分析。两种肿瘤均显示浸润的免疫细胞染色。请注意,Renca 肿瘤细胞中存在染色,而 4T1 肿瘤细胞中没有染色,这与相应细胞沉淀的染色结果一致。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 60 Expand Image
    使用 Axl (C89E7) Rabbit mAb(绿色)对 DU 145(左)和 HCC827(右)细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 61 Expand Image
    使用 Axl (C89E7H4) Rabbit mAb 对固定和透化的 Jurkat 细胞(蓝色,阴性)和 DU145 细胞(绿色,阳性)进行流式细胞术分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 62 Expand Image
    对过表达突变型人 APP695 的小鼠 Tg2576 脑细胞进行共聚焦免疫荧光分析。切片首先经 ASC/TMS1 (D2W8U) Rabbit mAb #67824(绿色)和 APP/β-Amyloid (NAB228) Mouse mAb #2450(黄色)标记。用 Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415 封闭游离二抗结合位点之后,切片用 GFAP (GA5) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate) #3657(红色)孵育。胞核用 Hoechst 33342 #4082(蓝色)标记。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 63 Expand Image
    使用 ASC/TMS1 (D2W8U) Rabbit mAb(绿色)对未经处理(左上图)或经 LPS(50 ng/ml,4 小时,中图)处理或经 LPS 处理、接着经 ATP(5 mM,45 分钟,右上图)处理的小鼠原代骨髓源性巨噬细胞 (BMDM) 和 J774A.1 细胞(左下图)或 Raw 细胞 264.7(右下图)进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。注意,经过LPS 和 ATP(白色箭头)刺激后,ASC 会转位至炎症小体。
    Microglia Cross Module Antibody Sampler Kit: Image 64 Expand Image
    使用 ASC/TMS1 (D2W8U) Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对 Raw264.7 细胞(蓝色)和 J774A.1 细胞(绿色)进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。